2023 年 3 月，《欧洲检验医学联合会、欧洲自身免疫标准化促进会、抗核抗体荧光模式国际共识关于抗核抗体检测的最新建议》在《Clin Chem Lab Med》上在线发表。该建议涉及以下 5 个方面：
-
以 HEp-2 细胞为实验基质的间接免疫荧光法（IIF）-ANA 检测和报告。
-
以 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 方法学特征，包括底物、荧光素标记二抗结合物及计算机辅助诊断系统（CAD）应用。
-
质量保证。
-
以 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 性能确认 / 验证。
-
固相免疫学检测技术（SPA）的应用。
具体建议如下：
-
以 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 结果应报告滴度和荧光模式。
-
多种 ANA 荧光模式，其患 ANA 相关风湿病（AARD）的可能性随着 ANA 滴度的增高而增加。
-
对于大多数 ANA 荧光模式，采用单一的 ANA 滴度结果，不能确定与 AARD 相关的最佳诊断灵敏度、特异性。
-
应考虑到 ANA 滴度有助于解释 ANA 检测结果。
-
对于 AARD 患者，报告 ANA 滴度特异性或检测结果特异性的似然比（LR），有助于以 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 结果的临床解释。
-
ANA 阳性可存在一部分健康人群中（如儿童、成人、老年人；阳性率会随着年龄增长而增加），在解释检测结果时应考虑到此情况。
-
在儿童中筛查 AARD，没有证据表明以 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 应采用较低的筛查稀释度。
-
ANA 荧光模式对临床相关性和指导下一步开展临床检测（如针对靶抗原的特异性自身抗体）提供有用信息。
-
以 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 结果的临床相关性与 ANA 荧光模式具有一定的相关。
-
将 ANA 荧光模式与其特异性自身抗体检测的结果相结合，可以加强 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 结果的解释。
-
主要 ANA 荧光模式（具有明确的临床相关性）包括：着丝点型（AC-3）、细胞核均质型（AC-1）、细胞核致密细颗粒型（AC-2）、核仁型 (AC-8,9,10)、细胞核颗粒型（AC-4,5）、细胞核多点型（AC-6）、细胞核核膜型（AC-11,12）、细胞浆网状 / 线粒体样型（AC-21）、细胞浆（致密）细颗粒型（AC-19,20）、细胞浆线性 / 肌动蛋白型（AC-15）。
-
HEp-2 细胞、HEp-2000 细胞、HEp-2010 细胞可以用作 IIF 筛查 ANA 的实验基质。
-
使用 IgG 特异性结合物可以满足检测大多数临床相关的 IIF-ANA。
-
使用多价结合物，会与抗人 IgG（Fc）特异性的结合物存在检测结果的差异。
-
CAD 可以支持 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 结果判断，但仍建议专家判读复查进行阳性 / 阴性鉴别。
-
CAD 可以支持 HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 荧光模式的判断，但专家必须对荧光模式进行判读复核。
-
部分 CAD 可提供荧光强度（FI）检测，可用于评估：ANA 滴度、AARD 可能性。
-
部分 CAD 进行重复检测 FI 值，作为质量指标的监测，如室内质控（IQC）。
-
HEp-2 细胞为实验基质的 IIF-ANA 的质量保证应通过内部（如每批次运行的 IQC、技术人员定期对代表性案例进行盲读）和外部质量评估项目进行监控。
-
减少实验室内部技术人员间结果判读的差异，可采取人员培训、双人判读、使用 ICAP 的命名规则及 CAD 判读。
-
每次运行中至少包括 2 份 IQC 样本，1 份阴性，一份弱阳性（筛查 AARD 的滴度特异性 LR 在 2-5），滴度通过终点稀释法或 FI 进行半定量判断。
-
除了试剂盒对照外，建议采用患者来源的 IQC 样品，无论是混合还是单一患者来源的标本，对它们的检测操作与常规样本相同，因而可以监测整个检测过程。
-
阳性对照的优选荧光模式最好具有较高的可重复性（如在 CAD 上为单一的细胞核均质型或细胞核颗粒型）。
-
在 Levey-Jennings 图中监测（低、中、高）阳性结果的百分比，可用于评估检测的稳定性（如监测制造商批次间变换的影响）。
-
使用 CAD 提供的 FI 值中位数，在 Levey-Jennings 图中监测 IQC 样品和患者标本在一段时间内的稳定性的敏感指标（如批次变化的影响）。
-
在开始新批次的试剂之前，应评估结合物和 / 或底物的在不同批次间的变异性。可通过患者来源的 IQC 样品来完成，尽量覆盖针对不同细胞成分的荧光模型（细胞核和细胞质），以及不同 ANA 滴度水平。
-
SPA 检测在筛查 / 检出 AARD 的性能因疾病和试剂而有所不同。
-
尚无单一 SPA 阈值兼具筛查 AARD 的高敏感性和高特异性