分子生物标志物检测的必要性
推荐意见 1：推荐 ICC 患者、特别是不可切除 / 转移性 ICC 患者进行分子检测，筛选获益人群（证据级别：高，推荐级别：强）。
分子生物标志物检测项目及方法
推荐意见 2：FGFR2 融合 / 重排是 ICC 的重要生物标志物，强调 ICC 患者、特别是小胆管型 ICC 患者行 FGFR2 变异检测（包括融合、突变、扩增）的重要临床意义；推荐对 FGFR2 融合 / 重排行 RNA - NGS 检测，而 DNA - NGS 能同时检出突变及扩增，有必要两者联合检测；若 NGS 不可及，推荐对 FGFR2 融合 / 重排行断裂探针 FISH 检测；FGFR2 断裂探针判读，阳性结果 cut - off 值还未有统一判读标准，推荐参照 ALK - FISH 的判读标准（证据级别：高，推荐级别：强）。
推荐意见 3：IDH1 突变是 ICC 的重要生物标志物，强调 ICC 患者、特别是小胆管型 ICC 患者行 IDH1 突变检测的重要临床意义；推荐选择 NGS 法，可同时检出多种形式的 IDH1 突变位点。若 NGS 不可及，可采用 Sanger 法，但灵敏度有限（证据级别：高，推荐级别：强）。
推荐意见 4：推荐 ICC 患者行 BRAF 基因检测；推荐采用 RT - PCR 或 NGS 法；可选择 IHC 对 BRAF V600E（推荐克隆号 VE1，Roche 公司）进行筛查（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 5：推荐 ICC 患者行 HER2 表达 / 扩增检测。HER2 表达可采用 IHC 常规检测；HER2 扩增采用 NGS 或 FISH。FISH 及 IHC 判读缺乏统一标准，推荐参考胃癌 / 乳腺癌标准，IHC2 + 建议 FISH 或 NGS 验证（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 6：推荐 ICC 患者行 NTRK 基因融合检测；pan - TRK IHC 可以作为初筛方法。如须多基因检测，推荐 DNA - NGS 为 NTRK 基因融合的首选诊断检测，RNA - NGS 作为 NTRK 融合基因检测的重要补充手段，有条件者 RNA - NGS 与 DNA - NGS 联合检测（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 7：推荐 ICC 患者行 RET 融合检测；推荐 RNA - NGS 检测 RET 融合，有条件者 RNA - NGS 与 DNA - NGS 联合，可满足多基因变异检测需求；若 NGS 平台不可及，推荐 RT - PCR（首选）或 FISH 检测；FISH 判读推荐参照 ALK - FISH 的判读标准（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 8：推荐 ICC 患者行 KRAS 基因突变检测；Sanger/PCR 可以满足临床检测 KRAS G12C 突变的基本检测需求；如果条件允许，建议选择 NGS 以获得更为丰富的 KRAS 变异信息（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 9：推荐 ICC 患者进行 MMR/MSI 检测，检测方案推荐 IHC 和 PCR，采用 NGS 检测法应联合 IHC 或 PCR 法验证（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 10：基于靶向药物的可及性及变异频率，本共识将检测基因分为必检基因和可检基因两类。必检基因包括 FGFR2 融合等 ICC 重要分子生物标志物。可检基因包括 NRG1 融合、PTEN 表达缺失等潜在靶点，可酌情检测，以便为其提供参与临床试验的机会（证据级别：中，推荐级别：强）。
样本选择
推荐意见 11：推荐在基因检测前，由病理医生对组织或细胞学标本进行肿瘤细胞含量评估（≥50 个肿瘤细胞）。对于晚期 ICC 活检样本，一次性切出病理诊断及分子诊断所需标本量，以提高基因检测的成功率（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 12：推荐使用肿瘤组织学标本进行基因检测；无法获取足够组织学标本时，推荐选用细胞学标本；若组织学和细胞学标本均不可及，可考虑在获得 CAP/PQCC/EMQN 等资质认证的机构行液体活检作为基因检测的补充手段（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 13：转移灶与原发灶基因改变基本一致，推荐在原发灶无法获得时，可取转移灶行基因检测（证据级别：中，推荐级别：强）。
ICC 基因检测策略优化
推荐意见 14：建议根据标本类型、标本质量、基因特点、平台可及性、检测周期及费用等因素，合理选择检测平台及方式。当可检组织有限，序贯检测单一标志物或使用有限的分子诊断组合可能导致样本迅速耗竭时，可使用合适的 NGS 技术同时识别相关的靶点信息。必要时可多平台互补和验证（证据级别：中，推荐级别：强）。
推荐意见 15：靶向药物治疗后因耐药或疾病进展的 ICC 患者，推荐行肿瘤组织再次活检，并针对本共识纳入推荐的分子靶点制订检测方案，或采用 NGS 检测一次性获取多种基因变异信息，力求获得详尽的潜在靶点药物治疗方案证据（证据级别：中，推荐级别：强）。