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证据水平:分为高(A)、中(B)、低(C)、极低(D)4 级。
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推荐级别:只分为 “强”“弱” 两级,即 1、2 两级。明确显示干预措施利大于弊或者弊大于利时,列为强推荐(推荐级别 1);利弊不确定或证据显示利弊相当时,列为弱推荐(推荐级别 2)。
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检测时机:月龄<4 个月婴儿可只进行正定型检测;月龄≥4 个月婴儿应进行正反定型检测。
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凝集强度要求:正定型检测,抗 A 或(和)抗 B 凝集强度≥3+(强度评分≥10 分)。反定型检测,月龄≥4 个月婴儿微柱凝集法、月龄≥6 个月婴儿室温试管法和 4℃试管法 A1 细胞或(和)B 细胞凝集强度≥±(强度评分≥2 分)。
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正反定型不符处理:1 周岁内婴儿 ABO 血型正反定型不符时,通常不使用血型血清学检测技术进行 ABO 血型亚型鉴定,条件允许时可使用分子生物学技术进行检测。
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检测要求:婴儿出生后 RhD 抗原检测凝集强度≥3+(强度评分≥10 分)。
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确认试验:RhD 抗原检测阴性的血标本应进行 RhD 抗原确认试验,宜使用 3 个或以上来源于不同克隆株的 IgG 或 IgG+IgM 抗 - D 试剂进行检测,确定是否存在弱 D 和部分 D。若未进行确认试验检测,应在报告单上注明 “初检”。
EDTA 抗凝血液标本或非抗凝血清标本≥1mL(与 ABO 血型鉴定同时检测时,标本量总量不少于 1mL)。标本采集应在检测前 3d 内,采集当日为第 0 天,宜采集后立即使用。
可采用试管法、微柱凝集法和微孔板法等,可选择手工检测或(和)全自动血型分析仪检测。
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ABO 血型鉴定:试管法中,单克隆抗 - A、抗 - B 血型试剂应符合国家相关要求,抗 - A 对不同细胞有相应效价和亲和力要求,A1 和 B 试剂红细胞浓度为 2% - 5%。微柱凝集法中,ABO 血型鉴定的微柱凝集卡及 A1 和 B 试剂细胞应符合国家相关要求,A1 和 B 试剂红细胞浓度为 0.5% - 1% 或按试剂说明书要求。微孔板法同试管法。
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RhD 抗原检测:试管法中,单克隆 IgM 抗 - D 应符合国家相关要求,效价应不小于 128,与 R1R1 细胞亲和力≥20 s,且试剂不应检测到 DVI 表型。微柱凝集法中,RhD 抗原检测的微柱凝集卡应符合国家相关要求。微孔板法同试管法。
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全自动血型分析仪判定结果时,应进行人工确认。
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月龄≤4 个月婴儿仅进行正定型检测时,应从原始血标本管再次取样复查正定型,宜采用不同检测方法或不同厂家检测试剂进行检测。
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月龄>4 个月婴儿,出现正反定型结果不一致时,应详细询问病史,可重新采集血标本进行 ABO 正反定型、设立自身对照并重复实验等操作。