该指南由中华医学会病理学分会等组织于 2023 年 10 月 30 日发布，其核心是规范非小细胞肺癌（NSCLC）细胞学标本上清液驱动基因检测流程，解决检测方法不统一等问题，为临床靶向治疗提供可靠依据，以下是核心内容解读：
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检测适用范围与标本类型
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适用场景：适用于无法获取足量肿瘤组织，或者肿瘤组织检测失败的 NSCLC 患者，像晚期患者常出现的组织标本不足情况。而且当病理评估显示细胞学标本中肿瘤细胞比例＜10% 时，指南推荐优先用上清液做驱动基因检测。同时其检测结果可用于指导靶向治疗药物选择，且临床研究证实，依据该检测结果用药的患者能获得有效治疗响应。
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推荐标本：明确体腔积液（胸腔积液、腹腔积液、心包积液等）、肺泡灌洗液、痰液等细胞学标本的上清液均适用。这类标本获取通过无创或微创操作即可完成，其中胸水上清液中 cfDNA 浓度极高，是血浆的 13 倍以上，检测优势尤为突出。
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标本制备与处理规范
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关键保护措施：上清液中的 cfRNA 极易降解，指南相关研究提出上清液与游离核酸保护液按 1:1 体积比例混合时，cfRNA 保护效果最佳。同时所采用的标本保存液、黏液溶解液等试剂，要保证不影响肿瘤细胞形态，避免干扰病理诊断。
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标准化流程：标本采集后需及时离心分离上清液与沉淀，分离过程要控制好转速和时间，防止细胞破裂影响游离核酸纯度。分离后的上清液需规范储存，减少核酸降解，为后续检测奠定基础。
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检测方法与优选策略
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可用检测方法：适用于外周血 cfDNA 驱动基因检测的方法均可用于该上清液检测，如 PCR 技术、二代测序（NGS）等。
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优先推荐方案：对于有条件的实验室，指南强烈推荐 NGS 技术。该技术能同时检测多种驱动基因变异，包括点突变、融合等，适配 NSCLC 驱动基因变异类型多的特点。且数据显示，用 NGS 检测上清液，融合类基因改变检测的灵敏度和特异性均能达到 100%。
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质量控制与结果判定
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全流程质控：检测前要核查标本采集时间、储存条件等，确保标本合格；检测中需设置阳性对照和阴性对照，监控实验试剂与操作误差；检测后要对数据进行标准化分析，剔除无效数据。同时实验室需建立统一的操作规范，缩小不同实验室间的检测差异。
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结果可靠性界定：该指南明确上清液检测结果准确性与肿瘤组织接近，且优于外周血。例如胸水上清液体细胞突变检出率达 98.4%，远高于血浆的 87%。若检测出现阳性结果，可直接作为靶向治疗依据；若为阴性，需结合患者临床症状、其他检查结果综合判断，必要时重复检测。
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临床应用价值
该指南打破了传统依赖肿瘤组织检测的局限。一方面，解决了部分患者组织标本获取难的困境，让更多 NSCLC 患者能完成驱动基因检测；另一方面，其检测结果能精准指导靶向治疗，像部分细胞蜡块检测阴性但上清液检测阳性的患者，接受对应靶向治疗后肿瘤实现部分缓解，极大地推动了 NSCLC 精准治疗的普及。