2016 年国际共识声明《Consensus Statement on next-generation-sequencing-based diagnostic testing of hereditary phaeochromocytomas and paragangliomas》聚焦遗传性嗜铬细胞瘤 / 副神经节瘤（PPGL）的二代测序（NGS）诊断流程，核心是建立标准化检测策略、明确基因组合与结果解读规范，以下为结构化要点总结：
一、核心适用人群与检测时机
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必检人群：所有 PPGL 患者（含肾上腺 / 异位、单发 / 多发、儿童 / 成人）；恶性 PPGL（优先 SDHB）、家族史阳性、合并遗传综合征（MEN2、VHL、NF1 等）、双侧 / 多灶肿瘤者。
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检测时机：确诊 PPGL 后尽早启动；术前完成胚系突变检测，指导手术决策与家族筛查。
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排除人群：无临床 / 影像 / 生化证据的无症状亲属（仅家族性突变携带者筛查）。
二、NGS 检测方案与基因组合
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方案类型 |
基因组合 |
适用场景 |
优势 |
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核心 Panel（优先推荐） |
SDHA/B/C/D/AF2、VHL、RET、NF1、MAX、TMEM127 |
初筛、散发性 / 家族性 PPGL |
覆盖 95% 以上致病基因，性价比高 |
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扩展 Panel |
核心基因 + EPAS1、FH、MDH2 等 |
恶性 / 转移性、表型特殊者 |
提高罕见突变检出率 |
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全外显子测序（WES） |
全基因组外显子区域 |
核心 Panel 阴性但高度怀疑遗传者 |
发现新致病基因，科研价值高 |
三、检测流程与质控标准
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阶段 |
操作要点 |
质控指标 |
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样本准备 |
优先外周血白细胞（胚系突变）；肿瘤组织用于体细胞突变分析 |
DNA 浓度≥50ng/μL，纯度 A260/A280=1.8-2.0 |
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测序与分析 |
靶向捕获 + NGS（Illumina/Ion Torrent）；生物信息学过滤低质量数据 |
测序深度≥100×，覆盖度≥98%，假阳性率＜0.1% |
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验证流程 |
疑似致病突变用 Sanger 测序验证；拷贝数变异（CNV）用 MLPA/array-CGH 确认 |
验证一致率 100% |
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报告规范 |
标注变异类型（致病 / 可能致病 / 意义未明）、ACMG 分级、临床建议 |
明确随访周期与家族筛查方案 |
四、结果解读与临床转化
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变异分级（ACMG 标准）
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致病 / 可能致病：启动家族筛查，制定个体化随访（如 SDHB 突变每年影像学监测）。
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意义未明（VUS）：结合免疫组化（SDHB 缺失提示 SDHx 突变）、功能研究与家族共分离分析。
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良性变异：排除遗传病因，常规随访。
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表型 - 基因型关联（核心指导）
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基因 |
典型表型 |
临床决策 |
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SDHB |
恶性风险高、异位 PGL |
强化肿瘤监测，家族成员必筛 |
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SDHD |
头颈部 PGL、父系遗传 |
优先筛查父系亲属 |
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VHL |
肾上腺外 PGL、VHL 综合征 |
眼科 / 中枢神经系统筛查 |
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RET |
MEN2 相关，合并甲状腺髓样癌 |
预防性甲状腺手术评估 |
五、家族筛查与风险管理
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筛查流程：先检测先证者，阳性者再对一级亲属行针对性突变筛查。
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管理策略：携带者定期生化（血浆 / 尿 MNs）、影像学（CT/MRI）监测；突变类型决定随访频率（如 SDHB 每 6-12 个月，VHL 每年）。
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生育指导：遗传咨询，必要时行产前诊断或胚胎植入前遗传学检测。
六、特殊情况处理
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体细胞突变检测：肿瘤组织 NGS 用于散发性 PPGL，指导靶向治疗（如 HIF2A 突变用 belzutifan）。
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与免疫组化结合：SDHB 免疫组化阴性提示 SDHx 突变，优先 NGS 检测 SDHx 基因。
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检测失败补救：重新采样、换测序平台或用传统 Sanger 测序补充。