脂肪组织采集
采集机构要求：应在取得《医疗机构执业许可证》的医疗机构中实施。采集人员需持医师或者护士执业证书并经专业技术培训。机构要有完整 SOP 和应急预案，采集需在层流手术室内无菌操作。
供者要求：需全面检查供者健康状况，包括一般信息、既往病史、家族遗传病等，进行病原微生物感染筛查及危险疫区停留情况调查。身体良好、无相关疾病，特定病毒及梅毒螺旋体阴性，另需提供不少于 8ml 外周血用于复检等。特殊情况如 HBV 等部分病毒阳性，实验室具备条件并使供者知情，可采集；HIV、梅毒螺旋体阳性或高度怀疑 HIV 感染、处于窗口期的供者不得采集。
采集方式、部位和采集量
采集方式：用肿胀液局部浸润麻醉，以注射器配备吸脂针呈扇形手动均匀吸取，吸出 3-5mm³ 脂肪组织颗粒，较大颗粒需手工剪制。
采集部位：可选择下腹部、大腿内或外侧等，接受注射溶脂等的部位不建议采集。
采集量：女性≤45 岁、男性≤50 岁不少于 50ml；女性 45-55 岁、男性 50-60 岁不少于 80ml；男性体脂＞25%、腰围＞100cm，女性体脂＞33%、腰围＞88cm 不少于 100ml。女性＞55 岁、男性＞60 岁或近期服用减肥药者不建议采集。
运输和接收：保存于无菌容器，贴条码标签，低温冷链运输，建议 48h 内送达。制备机构设接收取样工作区，目检有无污染或变质，建立异常情况处置 SOP。
ASCs 的制备与储存
总体要求：制备机构或研究应用机构应建立完善 SOP，采用 GMP 临床应用级原料或国家批准产品，制备人员经专门培训，建议在 B 级背景下 A 级洁净度环境中进行。
脂肪干细胞的分离：采集的脂肪组织用无菌生理盐水冲洗，加 Ⅰ 型胶原酶或胰蛋白酶混合液，37℃水浴或气浴振荡，离心后吸弃上层脂肪和液体，加生理盐水重悬，用细胞滤器过滤，滤液离心弃上清获 SVF，台盼蓝染色细胞计数。
脂肪干细胞的培养与传代：接种 SVF 至培养瓶，5% CO₂、37℃常规培养，细胞融合度 70%-80% 时传代，用无血清培养基或不含血清添加物的细胞培养基，记录相关信息。
建立脂肪干细胞种子细胞库：收集 P2 或 P3 代细胞做质量和性能指标检测，调整细胞浓度至（2-3）×10⁶个 /ml，分装冻存管，程序降温后转入 - 196℃液氮保存。
建立脂肪干细胞工作细胞库：经种子细胞库传代增殖，将 P5 代细胞制成均质细胞悬液，取样质控和安全鉴定，分装冻存于 - 196℃液氮中。