一、引言
侵袭性真菌感染（IFI）在免疫抑制患者中发病率与死亡率高，早期诊断与治疗关键。传统诊断方法耗时长，快速检测技术发展为 IFI 早期诊断提供可能。为规范河南地区 IFI 快速检测技术应用，提高诊断水平，制定本共识。
二、适用范围
本共识适用于河南地区各级医疗机构中，对疑似 IFI 患者进行快速检测的实验室诊断流程与临床决策参考。
三、IFI 快速检测技术
（一）血清学检测
1,3-β-D 葡聚糖检测（G 试验）
原理：1,3-β-D 葡聚糖广泛存在真菌细胞壁，除隐球菌与接合菌。检测样本中该物质与鲎试剂中凝固酶原激活物反应，引发凝固蛋白原形成凝固蛋白，通过比浊或显色法检测。
临床意义：动态监测对 IFI 早期诊断有价值，尤其念珠菌、曲霉感染。结果阳性提示可能存在 IFI，但需排除假阳性，如血液透析、使用某些抗菌药物等。
注意事项：应规范样本采集、处理与检测流程，避免污染。不同检测系统参考值有差异，需依据试剂说明书确定。
半乳甘露聚糖检测（GM 试验）
原理：曲霉细胞壁特有成分，侵袭性曲霉感染时释放入血。采用双抗体夹心 ELISA 法检测。
临床意义：对侵袭性曲霉感染诊断特异性较高，连续监测可提高诊断准确性。在血液系统恶性肿瘤、造血干细胞移植患者中应用价值大。
注意事项：使用某些抗菌药物（如哌拉西林 - 他唑巴坦）、食用某些食物（如牛奶）可能致假阳性。样本采集时间与频率影响结果，建议每周 2 - 3 次。
（二）分子生物学检测
聚合酶链反应（PCR）检测
原理：扩增真菌特定 DNA 片段，通过凝胶电泳、荧光定量等方法检测。
临床意义：快速、灵敏，可检测多种真菌，对早期诊断有帮助。可区分真菌种类，指导针对性治疗。
注意事项：易污染致假阳性，需严格规范操作流程，设阴性、阳性对照。不同引物与检测方法敏感性、特异性有差异，需合理选择。
二代测序（NGS）技术
原理：对样本中全部核酸进行高通量测序，分析真菌 DNA 序列。
临床意义：无需培养，可检测罕见、苛养真菌，发现新病原体。适用于疑难、重症 IFI 诊断。
注意事项：成本高，数据分析复杂，需专业生物信息学人员。假阳性、假阴性问题待解决，结果需结合临床综合判断。
（三）微生物质谱技术
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI - TOF MS）
原理：样本中微生物蛋白离子化，根据飞行时间与质荷比鉴定。
临床意义：快速准确鉴定培养出的真菌，缩短鉴定时间。对丝状真菌、酵母样真菌鉴定效果好。
注意事项：样本前处理影响鉴定结果，需规范操作。数据库需定期更新，保证鉴定准确性。
四、检测流程与策略
疑似患者筛查
对免疫抑制、长期使用抗菌药物、入住 ICU 等高危患者，出现发热、肺部浸润影等疑似 IFI 症状体征，进行快速检测筛查。
检测项目选择
结合患者临床特征、危险因素选检测项目。如血液系统疾病患者疑曲霉感染，优先 GM 试验与 PCR 检测。
多种检测联合应用提高诊断准确性，如 G 试验 + GM 试验，或血清学 + 分子生物学检测。
动态监测
对疑似患者定期检测，观察指标动态变化。如 G 试验、GM 试验连续监测，依据结果调整治疗方案。
五、结果判读与临床应用
血清学检测结果判读
G 试验：不同试剂临界值有别，一般以＞80pg/ml 为阳性，需结合临床症状体征判断，单次阳性需复查。
GM 试验：以吸光度（A）值≥0.5 为阳性，连续 2 次阳性诊断意义大，同时考虑假阳性因素。
分子生物学检测结果判读
PCR 检测：阳性提示样本中存在真菌 DNA，需排除污染，结合临床判断感染。定量 PCR 可评估真菌载量，指导治疗。
NGS 检测：阳性结果提供真菌种类信息，因假阳性可能，需结合临床、其他检测结果诊断。
微生物质谱技术结果判读
MALDI - TOF MS 鉴定结果以得分表示，得分≥2.0 鉴定到种水平，1.7 - 1.99 鉴定到属水平，＜1.7 需重复或用其他方法鉴定。
六、质量控制
室内质量控制
血清学检测：定期用质控品检测，评估检测系统稳定性与准确性，失控查找原因并纠正。
分子生物学检测：设阴性、阳性、空白对照，监测扩增过程，防止污染，定期校准仪器。
微生物质谱技术：用标准菌株验证，定期维护仪器，确保性能稳定。
室间质量评价
参加省级或国家级室间质评活动，评价实验室检测能力，对不满意结果分析整改。
七、人员培训与实验室建设
人员培训
对实验室与临床人员培训 IFI 快速检测技术原理、操作、结果判读与临床应用，提高业务水平。
实验室建设
依据检测技术要求建设实验室，如分子生物学检测设试剂准备、样本处理、核酸扩增、产物分析区，防止污染。
配备仪器设备并定期维护校准，保证检测质量。