PCR产物的检测PCR-ELISA法 在一个引物的5端标记上生物素以便使其能与包被板上的亲合素结合而固定PCR产物，而在另一引物的5端标记FITC，用HRP标记的抗FITC抗体与之结合显色，即可进行常规ELISA检测。如设立标准对照，此技术还可用于定量分析。 【试剂与配置】...

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术（APAAP法） 【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法)，是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用，其中一个Fab段连接McAb ，另一个Fab段连接APAAP复合物，再通过复合物中的碱性磷酸酶...

操作简便，不需要特殊仪器（酶联检测仪）。 【试剂及配制】 (1) 稀释液：为1%A的0.01mol/L pH7.4的。 (2) 封闭液：为2% A的0.01mol/L pH7.4的。 (3) 洗涤液：为0.5% Tween 20的0.01mol/L pH7.4的。 (4) 底物溶液：见附录。 【操作方法】 (1) 取适当大小NC膜（...

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于双抗体夹心法ELISA 该法多用于检测多价大分子抗原，但不能用于检测半抗原等小分子物质。 【试剂及配制】 （1） 包被液（pH 9.6 碳酸盐缓冲液） Na2CO3 0.16g NaHCO3 0.29g 蒸馏水加至 100ml (2)稀释液(pH 7.4 -Tween 20) KH2P...

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于细胞ELISA 应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多，非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术，其中以酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent aay，ELISA）最常用，它可用于测定抗体，也可测定可溶性抗原...

酶标抗体的质量鉴定与保存 1． 酶活性和抗体效价测定 采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2． 酶量和IgG量 酶量（mg/ml）=OD4030.4 IgG量（mg/ml）=（OD280-OD4020.42）0.940.62 其中，0.42为...

改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基，再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联，在标记前先用2，4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后，再...

戊二醛二步交联法制备酶标抗体 戊二醛（glutaraldehyde，GA）：是一种常用的同型双功能交联剂，它的两个醛基可分别与HRP和抗体蛋白的氨基形成Schiff碱（-N=C-），将他们以五碳桥连接起来。戊二醛连接反应是最温和的交联反应之一。可在4-40℃范围，pH6.0-8.0的...

果蝇类标本的辣根过氧化物酶标记试剂染色检测操作步骤 (1)样品洗毕后(见前)，悬于含1％正常羊IgG的中。在1．5ml锥形管中胚胎或其他样品所占体积应少于50txl，或在5mlap-top管中应少于200／A。摇动孵育1h。 (2)用洗2次。 (3)加一抗：用含蛋白质的溶液，如含羊I...

果蝇类标本的辣根过氧化物酶标记试剂染色检测 酶标试剂的检测是利用可溶性的色原物质经酶促作用发生沉淀反应，在酶反应部位产生不溶性的有色物质(Avrameas and Vriel 1996；Nakane and Pierce 1967 d，b；Avrameasl972)。每种酶可利用一定范围的底物，但对于...