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  • 胶体金(collaurum; colloidal gold)制备方法2017-10-15 11:16:42

    胶体金的制备一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1、枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加...

  • 胶体金制备注意事项及应用2017-10-15 11:15:10

    一、胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存 胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。 金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性...

  • 胶体金的质量鉴定方法2017-10-15 11:13:58

    胶体金制备完毕后须经电镜下质量鉴定才能应用。 一、胶体金颗粒直径测定 用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内,取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察,主要观察金颗粒的大小,符合不符合所需要的颗粒直径,金颗粒是否均匀...

  • 胶体金标记实验操作步骤2017-10-15 11:13:12

    1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大...

  • 免疫电镜胶体金标记法-22017-10-15 11:12:28

    (4)胶体金与蛋白A的结合和纯化,依上法测得所需的比例超过10%,即每30ml胶体中加入2mg蛋白A,5min后,加入0.3ml PEG作为稳定剂,然后以15000r/min离心45min(不同方法制备的金离心速度不同),略带红色的松散的复合物沉淀即为PAg复合物。小心弃去上清液,加...

  • 免疫电镜胶体金标记法-12017-10-15 11:11:44

    金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很...

  • 胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法)-22017-10-15 11:11:00

    (2)0、5mol/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液:Tris,60.57g,1mol/L Hcl约420m1,调pH值至7.4,最后加双蒸水至1000m1,此为储备液。 (3)0、05mo1/L Tris缓冲生理盐水:氯化钠8.5-9g;0.5mo1/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液100m1;加双蒸水至1000m1,调pH值至7.4. (4)0...

  • 胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法)-12017-10-15 11:10:15

    PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性,又能保持高度的稳定性,PAg复合物...

  • 斑点免疫渗滤试验(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA)2017-10-15 11:09:32

    斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫...

  • 胶体金快速斑点免疫分析-22017-10-15 11:08:48

    四、胶体金块快速免疫结合分析的应用 应用领域很广,可分为临床应用与非临床应用两类。目前应用多以前者为主。 1、临床应用 已应用于临床的很多领域。由于目前它还是定性分析,故主要用以检测正常体认中不存在的生物活性物质(如传染病的抗原及抗体),以及正...

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