在果蝇类标本内加人抗体及酶标试剂染色检测 一旦果蝇类标本被固定及透化处理后，便可加入抗体。如同其他免疫组化技术一样可以直接用标记的一抗，或者通过标记的二级试剂(能与一抗特异性结合)进行检测。一般而言，直接标记一抗产生的信号更为清晰，背景较低。...

半乳糖苷酶标记试剂 半乳糖苷酶已被广泛用于酶标记免疫分析，但主要用于免疫细胞化学。一种较好的底物是5溴4氯3吲哚D吡喃型半乳糖苷(BCIG)，它可以产生一种深蓝色的产物。此产物在乙醇和水中稳定，不溶解。 1．需要的溶液、试剂和特殊设备 BCIG； N，N二甲基...

碱性磷酸酶标记试剂 BCIP／T是碱性磷酸酶最常使用的呈色底物，碱性磷酸酶标记的试剂应该用真核生物的碱性磷酸酶，因为这种酶容易被EDTA灭活。细菌酶难以终止其活性，易引起显色过度，导致较高背景。 BCIP／T底物在酶结合位点形成强烈的黑紫色沉淀，此反应是一...

辣根过氧化物酶标记的试剂 底物范围较广，包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺／金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐...

用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测的实验步骤 (1)将盖玻片、载玻片或培养板置于水平面上；如为1h或1h以下的短程孵育，则勿需湿孵，可将盖玻片或载玻片直接放置在实验台上。多个盖玻片则需置于Parafilm膜上，因为Parafilm膜有弹性，能够防止抗体溢出盖玻...

用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测及常见问题 间接法是用未标记的一抗和标记有HRP的二级试剂，经过简单孵育后，进行酶促反应。将抗体直接加入细胞中就可以使一抗与细胞上的抗原结合，在加入不同抗体或同一抗体不同稀释度的溶液时，注意不要发生交叉污染...

荧光素标记试剂与酶标试剂 (1)酶标试剂：酶标抗体仅需适当底物和普通光学显微镜即可高度敏感地检出抗原。由于信号是通过吸收光的差异，而非发射光来检测，底物的不溶性显色产物分布在酶所在位置的周围区域，因此这种检测方法尚不能达到荧光技术的分辨率。 酶...

ELISA检测筛选到的靶分子结合肽 【材料和试剂】 （1）酶标板，酶标仪 （2）湿盒 （3）吸水纸 （4）LB培养基 （5）PEG/NaCl （6）T （7）0.1M NaHCO3（pH 8.6） （8）HRP底物缓冲液 ABTS贮存液：在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液（pH 4.0）中溶解22mgABTS，过滤除菌...

ELISA检测噬菌体抗体与目的抗原的亲和力 【材料和试剂】 （1）酶标板 （2）酶标仪 （3）0.5mol/L Na2CO3(pH9.6) （4）1％A （5）HRP标记的抗M13噬菌体多抗 （6）2mol/L H2SO4 【操作步骤】 (1)将抗原用或0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)稀释至10g/ml; (2)对于要检测的...

免疫学方法（ELISA法）检测细胞凋亡 细胞凋亡事件发生时，会出现蛋白质和核酸分子结构的改变，形成新的表位。利用免疫学方法对这些表位进行鉴定，有助于判断样本中细胞凋亡事件的发生。 细胞凋亡的发生，是由于内源性核酸内切酶的激活，这种钙和镁依赖性核酸...