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  • 细胞培养的八个常见问题与解答(FAQ)2017-10-15 17:11:06

    1 冷冻管应如何解冻? 取出冷冻管后,须立即放入37C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时,是...

  • 从原代组织细胞和原培养容器分离细胞的技术2017-10-15 17:10:23

    一、从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以...

  • 细胞分离技术(Cell Isolation)2017-10-15 17:09:41

    一、离心技术 离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体,以及各种大分子基本手段。一般认为,转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机;转速超过25Kr/min,离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/min,离心力超过...

  • 肿瘤细胞培养方法简介(机械刮除法、反复帖壁法、消化排除法、胶2017-10-15 17:08:57

    一、机械刮除法 1、标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。 2、刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入瓶皿中,肉眼或显微镜窥视下,刮除无标记空间。 3、用Hanks液冲洗一两次,洗除被刮掉的细胞。 4、注入培养液继续培养,如发现仍...

  • 植物细胞培养(plant cell culture)技术概述2017-10-15 17:08:14

    植物细胞培养技术就是为了某种目的而在细胞水平上对离体植物细胞或原生质体进行的一系列生物工艺学操作。它包括分离、培养、再生以及一系列相关的操作。就有用化合物的生产来说,它主要是指在无菌条件下通过悬浮培养植物细胞生产有用化合物的过程。 理论与技...

  • 细胞培养无菌操作技术规范2017-10-15 17:07:32

    1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。 2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。 3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。 4.风淋2分钟。 5.0.1%过氧乙酸水泡手,擦干。 6. 点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品...

  • 常规组织初代消化培养操作方法步骤2017-10-15 17:06:50

    1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75% 酒精擦拭手至肘部。 2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用 Hanks 液漂洗 2~3 次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青...

  • 细胞培养的概念、原理、一般过程和无菌环境-32017-10-15 17:06:06

    (三)塑料制品的清洗 塑料制品特点:质软、易出现划痕;耐腐蚀能力强、但不耐热。 清洗程序:使用器皿后立即用清水清洗,浸于自来水过夜,用纱布或棉签和50℃清洗液刷洗,流水冲洗,晾干,浸于清洁液15分钟,流水冲洗(15-20遍),蒸馏水浸洗三次,双蒸水泡2...

  • 细胞培养的概念、原理、一般过程和无菌环境-22017-10-15 17:05:22

    四、冻存及复苏 为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞...

  • 细胞培养的概念、原理、一般过程和无菌环境-12017-10-15 17:04:37

    现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现...

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