1.基本营养物质 (1)糖 六碳糖主要能源、维持渗透压,含葡萄糖1-5%。 (2)氨基酸 维持生存需12种氨基酸(精、胱、亮、异亮、赖、蛋、苯丙、苏、色、组、酪、缬)。谷氨酰胺需量最大,缺乏时细胞生长不良。 单细胞培养或细胞量少时,所需氨基酸的种类和量增...
一、原理 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞...
培养方法如下: 1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液中漂洗一、二次。 2、置于30―50倍体积的Hanks液中,此时脑组织比较柔软,反复吹打即制成细胞悬液。 3、把悬液注入离心管室温中直立5-10分钟后,细胞或细胞团快自...
体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下: 一、上皮细胞培养 上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰...
一. 设备: 无菌操作设备。 二. 大型设备: CO2培养箱:恒温5%、10%CO2维持培养液中pH值。 倒置显微镜:用于每天观察贴壁细胞生长情况。 解剖显微镜,用于准确地取材。 常温冰箱:-4℃,用于保存各种培养液,解剖液和鼠尾胶。 低温冰箱:-20℃--80℃,用于...
巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小...
17.20℃下配制的缓冲液,在较高或较低的温度下PH值会改变吗? 对于普通使用的缓冲液,PH值随温度变化而变化。 下表列出温度改变10℃时,PH值的变化情况 例如 20℃下配制PH7.4 Tris缓冲液,40℃时PH值为 7.4-(2x0.310)=6.78 缓冲系统 pKa/20℃ [Delta]pKa/10...
1.为什么要热灭活血清? 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。 2.如何用台盼兰计数活细胞? 用...
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于一196~C液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而...
细胞培养基发展趋势 1.无血清培养基 是设计用来在无血清条件下促使特殊类型的细胞生长或进行专门应用的培养基。需要添加生长因子和 /或细胞因子,含有个别蛋白或大量蛋白组分。其主要优点: 增加确定性; 性能更一致; 容易进行纯化和下游加工; 提高制品安...