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  • 克隆基因的表达(expression of cloned gene)(3)2017-10-13 10:28:51

    (3)原核生物的基因组基本上是单倍体,而真核基因组是二倍体。 (4)如前所述,细菌多数基因按功能相关成串排列,组成操纵元的基因表达调控的单元,共同开启或关闭,转录出多顺反子(polycistron)的mRNA;真核生物则是一个结构基因转录生成一条mRNA,即mRNA是...

  • 克隆基因的表达(expression of cloned gene)(2)2017-10-13 10:28:15

    在双链 DNA 分子中,只有一条链转录成 mRNA,这条链称为有意义链(sense strand),该基因的另一条链则称反意义链(antisense strand)。在含有许多基因的 DNA 双链中,每个基因的有意义链并不是在同一条 DNA 链上。也就是说,一条链上既具有某些基因的有意义链,...

  • 克隆基因的表达(expression of cloned gene)(1)2017-10-13 10:27:41

    基因表达(gene expression)是指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。典型的基因表达是基因经过转录、翻译,产生有生物活性的蛋白质的过程。 基因的表达主要涉及到两个过程:转录和翻译。 第一节影响外源基因表达的因素 利用基因工程...

  • 探针的非放射性标记技术2017-10-13 10:27:04

    核酸探针是指能与特定核酸序列发生特异性互补的寡核苷酸链。核酸探针有双链DNA探针、单链DNA 探针、RNA探针和寡核苷酸探针。特异性探针来源于目的核酸的酶切片断、dd-PCR等差异显示中出现的差异片断、AFLP、RFLP、RAPD、SSR、CFLP等标记实验中出现的特异性基...

  • 基因的翻译表达(2)2017-10-13 10:26:28

    方法 1:重组载体构建同前面实验 2:诱导表达:提取带重组片断的质粒DNA转化BL21(DE3)受体菌37℃活化过夜,转入新鲜培养基摇菌至对数生长期(约2-3小时),加入IPTG至终浓度0.4mM,继续培养6小时 3:表达产物提取及鉴定见实验十九 二:融合表达 仪器:同...

  • 基因的翻译表达(1)2017-10-13 10:25:54

    1体外TNTRT7 转录/翻译系统表达重组基因 体外翻译是研究基因表达、基因调控的一类重要技术,该技术可广泛用于基因表达量、启动序列等调控因子的确立,并结合PTT实验筛选天然突变或人工诱变的基因片段,还可用来进行蛋白和DNA结合方面的研究。早期的体外翻译研...

  • 报告基因(report gene)的应用2017-10-13 10:25:09

    报告基因被广泛地应用于细胞生物学中的基因表达和细胞相关内容的研究。常用的报告基因主要有GUS基因、CAT基因、hGH基因、Cato2ase基因、绿色荧光蛋白基因及萤火虫荧光素酶基因等。在这些报告基因中萤火虫荧光素酶基因因其表达产物-荧光素酶敏感性高,测定方...

  • 基因表达轮廓(gene expressed profile)技术(3)2017-10-13 10:24:36

    电子杂交即虚拟的RNA杂交(Virtual northern blots)。用已知的EST序列为起始序列,采用BLAST(Basic Local Alignment Search Tool,BLAST)检索程序检索数据库中与其同源或有部分重叠的EST序列,以分别确定EST是属于已知基因还是已知EST或新发现的EST序列。 电子延...

  • 基因表达轮廓(gene expressed profile)技术(2)2017-10-13 10:24:00

    经过这轮RDA过程,Tester中的目的DNA将得到第一次富集。将第一轮产物更换新接头,进行第二轮RDA过程,目的DNA可得到进一步的富集。该技术假阳性很低。但仍不能解决个体mRNA在丰度上存在巨大差异的问题,当靶序列浓度较低时,其富集受抑制。 3:抑制消减杂交(su...

  • 基因表达轮廓(gene expressed profile)技术(1)2017-10-13 10:23:26

    基因表达谱或基因表达轮廓(gene expressed profile)技术就是利用mRNA提...

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