《计算机辅助精子分析的实验室应用中国专家共识（2025）》解读

编写组：江苏省妇幼健康研究会生殖检验质控联盟；发表《中国男科学杂志》2025 年第 3 期；参考 WHO 第 5/6 版、ISO23162:2021。 一句话核心：CASA 适合精子浓度、活力与动力学参数检测；计算机辅助精子形态（CASMA）仅作为筛查，阳性必须人工复核；计数板、帧率、样本稀释、人员能力是结果互认的关键；CASA 不能完全替代手工镜检复核梅斯医学M...

一、CASA 定位与适用范围

CASA（Computer‑Aided Sperm Analysis）优势：自动化、可回溯视频、可输出精子动力学参数（VCL/VAP/VSL、ALH、LIN、STR 等），适合大批量样本。 局限性：受计数池、样本浓度、碎片、帧率、算法影响，实验室间变异大，不可直接等同于手工 WHO 标准镜检。

1. ✅推荐用于：精子浓度、前向运动 PR、非前向运动 NP、不动精子 IM，以及精子动力学运动参数检测；
2. ⚠️CASMA 计算机辅助精子形态学：仅筛查，不能单独出具形态学诊断报告；异常结果必须人工阅片复核；
3. ❌不推荐：直接用于无精子症确诊；高度浑浊大量碎片、大量上皮细胞 / 白细胞样本，必须手工复核；结扎术后评估不推荐 CASA。

二、设备、计数板与硬件参数规范（共识重点）

1. 计数板选择

• 优先一次性标准化计数池（固定深度），推荐 20μm 深度；不推荐普通载玻片 + 盖玻片自制池（厚度不均、蒸发快，结果波动极大）；
• 计数板必须做校准；避免重复清洗反复使用计数池，容易残留精子碎片，造成背景干扰。

2. 显微镜、相机与帧率

• 相差显微镜优先；相机帧率≥25 帧 / 秒（fps），推荐 50fps；帧率不足会低估精子速度、误判运动分级；
• 温控平台（37℃），减少温度对精子运动的影响；
• 设备安装完成必须全套性能验证：精密度、准确度、检出限、线性范围、携带污染、与手工方法比对。

三、标本采集、前处理与标准化检测流程

1. 标本采集：禁欲 2～7 天；手淫取完整精液，容器 37℃保温；送检 30min 内；
2. 液化：室温 / 37℃静置，液化时间 60min；超过 60min 仍不液化，按规范酶处理，记录处理方式，报告备注；
3. 浓度适配与稀释
   • 理想检测区间：2×10⁶ ～50×10⁶/mL；浓度＞50×10⁶/mL 必须稀释；稀释液建议含 BSA，保护精子运动；
   • 少精子（＜2×10⁶/mL）：增加视野数量，必要离心浓缩，离心浓缩会改变动力学参数，报告必须标注；
   • 样本混匀轻柔，避免气泡；上样静置 30～60s，消除液体流动再拍摄。
4. 计数要求：每份样本至少采集 2 个独立上样，累计分析≥200 个精子；评估运动分型最好≥400 个精子；两次检测结果差异超过可接受阈值，必须重测。

四、术语统一（和 WHO6 版对齐）

统一活力分类：

• PR：前向运动精子
• NP：非前向运动精子
• IM：不动精子 动力学参数：VCL、VAP、VSL、LIN、STR、WOB、ALH，报告动力学参数只用于科研 / 辅助生殖评估，不作为不育诊断唯一指标。

五、CASMA 计算机辅助精子形态分析

1. CASMA 仅作为初筛工具，不能独立出具正常形态百分率报告；
2. 染色方案推荐改良巴氏染色、Diff‑Quik；固定、染色质量直接影响 AI 识别；
3. CASMA 提示异常，必须人工阅片复核，人工阅片为形态金标准；
4. 形态学结果参照 WHO6 版严格标准。

六、人员培训、能力考核

1. 操作人员必须理论 + 实操培训；考核内容：手工精液分析、CASA 原理、样本制备、识别碎片干扰、结果复核；
2. 定期能力比对：CASA 结果与资深人工镜检比对，定期室间质评；未通过能力考核人员不得独立出具报告。

七、质量控制（内部 QC + 外部 EQA）

1. 室内质控：每批次 / 每日质控；质控品可以固定化精子质控玻片；监控浓度、PR%；记录漂移；
2. 室间质评 EQA：必须参加全国 / 省级精液室间质评；不参加 EQA 的实验室，CASA 结果不支持跨机构互认；
3. 记录与溯源：保存原始视频图像，可回放复核；记录仪器校准、维护、稀释、液化处理。

八、特殊样本处理要点

1. 不液化精液：可使用菠萝蛋白酶等酶液化，必须在检验报告注明酶处理，酶处理会影响动力学参数；
2. 高碎片 / 大量白细胞样本：CASA 易把细胞碎片识别为精子，强制手工复核；
3. 逆行射精标本：尿液中精子，离心后检测，报告备注标本类型，不能直接套用常规精液参考值；
4. 无精子症：CASA 筛查未见精子，必须离心沉渣手工镜检确认，CASA 不能直接诊断无精子症。

九、报告规范与临床解读

1. 报告必须标注：检测方法（CASA）、计数池类型、是否稀释、液化处理、样本是否离心；
2. 浓度、PR、NP、IM 是临床核心；动力学参数建议标注 “仅供参考，不作为独立诊断指标”；
3. 当 CASA 结果与临床明显不符，或样本质量差，优先手工复核，以手工复核结果为准。

十、核心推荐精简清单

1. CASA 适合精子浓度、活力、动力学参数检测；CASMA 形态仅初筛，异常必须人工复核，不能单独发形态报告。
2. 优先20μm 一次性固定深度计数池，不推荐自制玻片池；相机帧率≥25fps，推荐 50fps。
3. 样本液化≤60min；浓度＞50×10⁶/mL 必须稀释；理想检测区间 2～50×10⁶/mL；每份样本至少分析≥200 精子，最好≥400 用于活力分型。
4. CASA 不能直接诊断无精子症，必须离心沉渣手工镜检确认；大量碎片样本强制手工复核。
5. 人员必须培训考核；实验室开展 CASA 必须做仪器性能验证、室内质控、参加室间质评，才能实现结果互认。
6. 酶液化、离心浓缩、逆行射精样本，报告必须备注前处理方式；动力学参数仅供参考。
7. CASA 是辅助检测手段，不是完全替代 WHO 手工镜检；结果和临床矛盾时以人工复核为准。

十一、共识亮点

1. 国内首份专门 CASA 实验室标准化共识，解决国内 CASA 实验室间结果差异巨大的痛点，为精液结果互认提供规范；
2. 明确区分CASA 活力浓度检测和CASMA 形态筛查，纠正 “AI 形态直接出报告” 的误区；
3. 量化样本处理、计数精子数量、帧率、计数池等关键操作指标；
4. 明确无精子症确诊红线：CASA 阴性不能直接判定无精，离心沉渣人工镜检才是金标准；
5. 强调质控体系：性能验证、室内质控、室间质评、人员能力，缺一不可。