单细胞凝胶电泳（SCGE）是在核算沉淀法和晕圈分析及弱碱性条件下的单细胞凝胶电泳等检测技术的基础上逐渐发展起来的一种在单细胞水平检测哺乳动物有核细胞DNA断裂的新技术。主要包括Olive等建立的测定DNA双链断裂中性微凝胶电泳技术和Singh等建立的测定DNA单...

1）原位缺口翻译检测裂解的DNA片段： 1、取106经促调亡物质处理的细胞，用1％ BSA-PBS洗涤细胞后加入0.1ml FITC标记的抗CD4或抗CD8单克隆抗体，4℃ 20分钟。用1％ BSA-PBS洗涤细胞。置冰上。 2、加入0.1ml 1％多聚甲醛，置冰上5分钟，加入60％（v/v）甲醇溶液...

1）铕荧光检测法： 标记靶细胞： 1、EuCl3的制备：称取58.08mg Eu2O3，用少量1N HCl搅拌至溶解，再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33～100mmol/L的保存液，4℃保存备用。 2、用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5106/ml，加50l 10mg/ml硫酸葡聚糖，置冰浴中...

（一）药物对肿瘤细胞的抑制效应的MTT法： 用培养基将肿瘤细胞调整至2 X108个/L，在96孔板中每孔加入100ul细胞悬液于37℃、5% CO2下培养过夜。 次日每孔加入不同浓度的药物100mg/L作为试验组，设加完全培养基不加药物的阴性对照，并用功能明确的药物为阳性对...

G2 期 是DNA复制结束和开始有丝分裂之间的间隙，在这期间细胞合成某些蛋白质和RNA分子,为进入有丝分裂提供物质条件。 用放射标记的RNA前体和蛋白质前体示踪,表明G2 期进行着强烈的RNA和蛋白质的合成。假如破坏这些合成过程,细胞就不能过渡到M期。G2 期合成的...

以有丝分裂方式增殖的细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程。这一过程周而复始。 细胞周期是50年代细胞学上重大发现之一。在这之前认为有丝分裂期是细胞增殖周期中的主要阶段，而把处于分裂间期的细胞视为细胞的静止阶段。 1951 年霍华德等用32P-...

用途 在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的；相反，不产生荧光的细胞，表明是无力的。 本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性，用染料处理时，活原生质体不吸收染料，细胞未染上颜色，而死细胞立即吸附大量染料而染上颜色。 (一)荧光法 操...

二、透射电子显微镜观察方法 培养细胞的取材和固定 1、常规收集帖壁和悬浮细胞，置离心管中离心， 800 ～ 1000r/min ， 10min 。 2、用 0.01mol/L PBS 5ml 重悬细胞。 3、将细胞悬液吸入有琼脂空槽的离心管中。 4、离心， 2000r/min ， 15 ～ 20min ，使细胞...

一、普通光学显微镜观察方法 （一）苏木素－伊红染色（HE 染色法） 石蜡组织切片的HE染色 1、取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，4m切片。 2、切片常规用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min二甲苯（Ⅱ）5min100％乙醇2min95％的乙醇1min80％乙...

1、96孔细胞培养板中培养细胞，去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次（如为悬浮细胞则用离心洗涤）。 2、去洗涤液后加入磷酸酶底物100l/孔。 3、37℃，孵育1～4h。 4、加入0.1mol/L氢氧化钠10l/孔。 5、在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度，将细胞培养板其中不含细...