问:看到很多讨论说 96孔四周不做数据处理,那么还是要加细胞或培养基吗?如果我把四周设为空白孔(不加细胞)作为阴性对照,可以用来调零或计算抑制率不? 答:可用只加培养基组作为正常对照组,来计算细胞生存率=给药组MTT/正常组MTT100%,余空可不加任何物...
1.细胞培养与MTT 问:做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少? 答:我觉得细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平。 比如我做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于比较...
(一)培养板的清洗和消毒 培养板一般为一次性使用,尤其在接触了有毒、有害等物质后更应该处理后丢弃。但如果要反复使用则一定要进行正确的清洗和消毒,以保证细胞培养的效果。 问:只有紫外照射可以保证无菌吗?可不可以从清洗方面做点工作? 答:看你什么用...
四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝 操作步骤 一、接种细胞 1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。 2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来。用培养基重悬细胞,计数。 3、将细胞稀释至2.5103-50103 个/ml,每个微滴定板可容纳20ml细胞重悬液...
进实验室这么长时间了,每一天都好像过得很艰难,每一项实验的完成都很辛苦,其中的每一个细节都不能大意,不然做得一切都要前功尽弃。 实验室里没有人做细胞爬片,我连见都没见过,老板的实验却要求这个东西,只能自己摸索。查资料 搜信息,自己实践,终于做...
MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑蓝为基...
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时...
细胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。目前对细胞凋亡的认识正不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。 一、光学显微镜观察 凋亡细胞的主要特...
(一)原理 IL-8对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理盐水溶液。 (2)淋巴细胞分层液比重为1.077+(-)0.001。 (3)2%琼脂糖:称取2g琼脂糖...
Treg细胞概述 高效免疫抑制剂的发现及其联合应用使临床器官移植的急性排斥反应大大降低,移植物的存活时间明显延长;器官移植成为挽救终末期器官功能衰竭患者生命的重要有效途径。但是免疫抑制剂具有明显的毒副作用(如对重要脏器的损伤、降低抗肿瘤及抗感染...