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  • 光学显微镜的使用、植物细胞有丝分裂的制片和观察(2)2017-10-12 08:40:39

    (三)固定 用蒸馏水洗净材料,再用卡诺固定液(用量应为材料体积的15倍以上)室温下固定30~60分钟。固定的材料如暂不制片,可经90%酒精80%酒精70%酒精(各半小时)浸泡进行转换,最后置于70%酒精内放入0~4℃冰箱,约可保存半年。如保存时间太长,需重新...

  • 光学显微镜的使用、植物细胞有丝分裂的制片和观察(1)2017-10-12 08:40:06

    一、目的与要求 1、掌握光学显微镜的构造及使用方法。 2、掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术。 3、掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。 二、实验原理 有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规律地、均匀...

  • 细胞凋亡(apoptosis)的检测(2)2017-10-12 08:39:34

    【材料】 1?试剂:吖啶橙贮存液(10mg吖啶橙溶解于100mLPBS中,过滤,4℃避光保存),0.01mol/L、Ph6.8PBS。 2?器材:吸管,试管,玻片,荧光显微镜。 【方法】 1?制备待检活细胞悬液,浓度约为1107/mL。 2?取95uL的细胞悬液,加5uL的吖啶橙贮存液混...

  • 细胞凋亡(apoptosis)的检测(1)2017-10-12 08:39:01

    细胞凋亡(apoptosis)是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式。其发生诱因及形态学特征均有别于坏死,与人类免疫系统的发生发展、神经组织发育、器官的形成、肿瘤的发生发展等诸多生物学现象之间有着密切联系,并且是免疫应答过程中免疫细胞的杀伤机制之一。...

  • 淋巴细胞转化实验(Lymphocyte transformation test-LTT)(2)2017-10-12 08:38:25

    同位素掺入法淋转试验,较之形态学方法更为客观、准确,重复性也好,但需一定设备条件。 [实验材料] 1.1640 培养液 2.ConA :根据ConA 的纯度配制成最适浓度,一般为5-10g/ml 。 3.脂溶形闪烁液: POPOP(1,4 双(5-苯基恶唑基-2)苯0.4g PPO[2, 5二苯基恶唑]4g...

  • 淋巴细胞转化实验(Lymphocyte transformation test-LTT)(1)2017-10-12 08:37:51

    [实验原理] T淋巴细胞表面具有植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白(ConA)等非特异性有丝分裂原受体,在体内或体外遇到有丝分裂原刺激后,可转化为淋巴母细胞,依其细胞转化程度可测定T细胞的应答功能,称为淋巴细胞转化试验。 淋巴母细胞的主要特点: (1)形态学改变:...

  • T 淋巴细胞转化试验(T Lymphocyte Transformation Test)2017-10-12 08:37:21

    一、 基本原理 T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。 淋巴...

  • 细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)(Assay of Cell Apoptosis)2017-10-12 08:36:47

    2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA 的A-T碱基区...

  • 细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)(Assay of Cell Apoptosis)2017-10-12 08:36:14

    一、实验原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋...

  • 细胞免疫荧光(immunofluorescence)操作步骤2017-10-12 08:35:41

    1.细胞爬片; 2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮); 3.PBS漂洗5min; 4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理); 5.PBS漂洗2次,每次5min; 6.1%BSA封闭30min; 7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h; 8.PBS漂洗2次,每次5m...

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