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  • 细胞计数及活力测定原理和操作步骤2017-10-12 09:24:01

    一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞 ,总细胞 中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织...

  • 细胞的分裂指数测定原理和操作步骤2017-10-12 09:23:33

    一、原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定细胞 周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择...

  • 淋巴细胞转化试验(MTT)2017-10-12 09:23:02

    (一)原理: 四甲基偶氯唑盐(MTT)可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢,将结晶的甲臢溶解释放后,可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性,从而推知待测样品的水平。 (二)材料...

  • LAK/TIL细胞的制备与活性测定2017-10-12 09:22:18

    淋巴因子激活的细胞毒性细胞(lymphokine activated killer,LAK)和肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)在机体的免疫防御中起着十分重要的作用,特别是在肿瘤免疫过继疗法中具有重要的应用前景,其制备及活性的检测对于评价机体的免疫状...

  • 小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤2017-10-12 09:21:47

    小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤: 1) 取小鼠骨髓用BD染色液制成约2108单细胞悬液 2) 阻断:加入Ms Fc BlockTM置冰上15min,0.25mg/106细胞 3) 加入Lineage Panel中biotin-mAb, 每种2ml/ 106细胞,冰上15min 4) IMag buffer洗涤, 加Streptavidin磁珠...

  • IL-2生物学活性检测(MTT)原理材料和方法2017-10-12 09:21:17

    (一)原理 白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活...

  • 细胞凋亡(apoptosis)简介-42017-10-12 09:20:48

    2、所有Caspase先以无活性的酶原(procaspase)的形式合成,其激活过程包括:①二聚体化②caspase自身序列裂解成小亚其和大亚基③除去prodomain。 3、最早发现的 caspase 为IL-1转化酶 (ICE=caspase-1) 它将 pro-IL-1 前体裂解成其活性形式。 ICE 基因转染导...

  • 细胞凋亡(apoptosis)简介-32017-10-12 09:20:19

    二、凋亡的生理功能 1、维持组织稳态平衡(homeostasis),通过干细胞分裂产生新细胞的同时,选择性地除去那些损伤的或老的或多余的细胞。 2、清除不需要的免疫细胞。 3、神经元发育 4、个体发育 三、凋亡细胞的形态学和生化特征 1、细胞皱缩(shrinkage) 2、...

  • 细胞凋亡(apoptosis)简介-22017-10-12 09:19:49

    在凋亡早期,活化的Caspase-3是主要的功能蛋白酶。凋亡细胞内,32kD的原酶裂解为17kD和12kD的亚单位,两个亚单位组成二聚体,即活化的Caspase-3,活化的Caspase-3进一步水解活化其它Caspase酶及胞浆内目标(如D4-GDI)和核内目标(如PARP)。 Bcl-2家族 Bcl-2...

  • 细胞凋亡(apoptosis)简介-12017-10-12 09:19:19

    细胞程序性死亡是正常生理现象,多发生于胚胎发育和维持组织自身平衡。Kerr et al.最早发现有两种细胞死亡:坏死(Necrosis)和凋亡(Apoptosis)。Apoptosis,希腊文意思是树叶从树上凋落,这里是指凋亡,是细胞主动参与自身死亡的过程。凋亡程序有一些特殊...

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