小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤

1) 取小鼠骨髓用BD染色液制成约2×108单细胞悬液

2) 阻断：加入Ms Fc BlockTM置冰上15min,0.25mg/106细胞

3) 加入Lineage Panel中biotin-mAb, 每种2ml/ 106细胞,冰上15min

4) IMag buffer洗涤, 加Streptavidin磁珠, 5ml/ 106细胞, 6-12℃ 30min

5) 放入磁场中8min, 将上清小心吸出、收集

6) 试管移出磁场, 加buffer重悬阳性片断, 反复吹吸后放入磁场8min

7) 小心吸出上清，一并收集

8) 重复上两步操作

收集的上清中即为通过阴性分离法得到的造血干/祖细胞