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  • 羊水细胞染色体制备方法(原位法)2017-10-12 10:08:55

    细胞培养 1. 将羊水(约20ml)转移到无菌的离心管中,1000rpm离心10分钟; 2. 去除上清液,用于其它分析,保留细胞悬液约0.5~1ml,用培养基混匀到2~2.5ml左右; 3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中; 4. 培养24/48小时后,向每只Chromslide培养皿中加...

  • 羊水细胞染色体标本的制备2017-10-12 10:08:23

    一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养...

  • 淋巴细胞染色体制备方法2017-10-12 10:07:54

    1. 向含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加全血0.5ml,盖紧培养瓶,充分混均; 2. 水平培养72 h(37℃); 3. 加入20ul 秋水溶液,培养2 h; 4. 离心5 min(2000 rpm); 5. 去除上清液,保留0.5ml的细胞; 6. 重新充分混悬细胞1; 7. 加入5ml 低渗溶液(KCl 0....

  • 骨骼细胞染色体制备方法2017-10-12 10:07:24

    1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度1106/ml),盖紧培养瓶,充分混均; 2. 水平培养12, 24, 48h(37℃); 3. 加入4-5滴秋水溶液,培养一定时间; 4. 离心3-4 min(2000 rpm); 5. 去除上清液,保留0.5ml的细胞; 6. 重新充分...

  • 骨髓染色体分析方法——快速法2017-10-12 10:06:22

    1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度1106/ml),盖 紧培养瓶,充分混均; 2. 水平培养12, 24, 48h(37℃); 3. 加入4-5滴秋水溶液,培养一定时间; 4. 离心3-4 min(2000 rpm); 5. 去除上清液,保留0.5ml的细胞; 6. 重新充分...

  • 染色体制备过程中的滴片方法2017-10-12 10:05:48

    样品:外周血,骨髓,羊水(消化法)及其它样品等 滴片方法: 1.载玻片:干的干净载玻片 2.滴片的细胞悬液量:每张载玻片1~2滴,每滴20~30ul 3.染色体分散时间:将滴有细胞固定悬液的载片放在Maxchrome抽屉中分散5分钟(5分钟,不影响染色体分散度) 4....

  • 细胞核与线粒体的分级分离2017-10-12 10:05:16

    【实验目的】 通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分,以了解其原理及过程。 【实验用品】 一、材料和标本小白鼠、冰块。 二、器材和仪器玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管...

  • 制备细胞裂解液(CELL LYSATE PREPARATION PROTOCOL)2017-10-12 09:53:25

    实验流程: 1. 收集胰蛋白酶消化的细胞并离心,用PBS清洗。 2. 用100l 裂解缓冲液冰浴溶解沉淀10min(每500000个细胞20l裂解缓冲液)。 3. 10000rpm,4C离心10min,取上清转移至新管。 4. 用考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度。 5. 用裂解缓冲液将溶液浓度调到5mg/m...

  • 细胞破碎(cell disruption)2017-10-12 09:52:54

    定义: 细胞破碎就是采用一定的方法,在一定程度上破坏细胞壁和细胞膜,设法使胞内产物最大程度地释放到液相中,破碎后的细胞浆液经固液分离除去细胞碎片后,再采用不同的分离手段进一步纯化. 1细胞壁的组成和结构 微生物细胞壁的化学组成和结构 细菌,肽聚糖...

  • 植物原生质体(protoplast)的制备2017-10-12 09:52:25

    一、实验目的 原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下,①具有再生细胞壁,进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力;②具有摄取外源大分子、细胞器,以及细菌,病毒的能力,因此是进行遗传操作,基因转移的好材料;③通过同种和异种植...

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