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  • 微粒体(microsome)的分离2017-10-12 10:18:24

    细胞通过匀浆破碎时,细胞质膜碎成片段,这些膜片段的末端融合形成的直径小于100nm的小泡。来自不同细胞器(细胞核、线粒体、质膜、内质网等)的小泡有不同的特性,所以可以将这些小泡相互分离。由内膜系统衍生而来的小膜泡形成相似大小的膜泡异质性集合体,...

  • 溶酶体(lysosome)的分离2017-10-12 10:17:51

    溶酶体是由一层单位膜包围,内含多种酸性水解酶的泡状结构。溶酶体含有40多种水解酶,其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶等。其主要功能是对细胞内物质的消化作用。此外溶酶体与器官形成、激素分泌的调节以及某些疾病的发生密切相关。可采用如下方法分离获得...

  • 细胞总蛋白质的分离提取2017-10-12 10:17:22

    细胞器是一种动态的结构,如内质网、细胞核和高尔基体等,其蛋白质组成除了驻留蛋白质之外,还包括穿梭蛋白质和瞬间相互作用的蛋白质。对于这些组成成分的研究,即亚细胞蛋白质组研究将有助于对这些蛋白质做全面的挖掘,从而对细胞器的功能作深入的阐述。蛋白...

  • 叶绿体(chloroplast)的分离与荧光观察2017-10-12 10:16:52

    叶绿体足植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作用就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。 实验目的 一、通...

  • [机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点2017-10-12 10:16:23

    1、高速组织捣碎机 捣碎机转速可达10,000r/min,具高速转动的锋利的刀片,宜用于动物内脏组织的破碎。 操作:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。 特点:由于旋转刀片的机械切力很大...

  • 细胞破碎技术的基本概念及其基本方法-32017-10-12 10:15:54

    (6)冻结-融化法 将细胞放在低温(-150C),然后在室温中融化,反复多次,细胞壁破裂。 (7)干燥法 经干燥后的菌体,其细胞膜的渗透性发生变化,同时部分菌体会产生自溶,然后用丙酮、丁醇或缓冲液等溶剂处理时,胞内物质就会被抽提出来。 破碎率定义为被破...

  • 细胞破碎技术的基本概念及其基本方法-22017-10-12 10:15:24

    (3)胶体磨 胶体磨的基本原理是流体或半流体物料在离心力的作用下,强制通过高速相对运动的定齿与动齿之间,使物料受到强大的剪切力,磨擦力、高频振动和高速旋涡等复杂力等作用,有效地被粉碎、乳化、均质、混合,从而达到精细超微的效果。定转子间的高速相对...

  • 细胞破碎技术的基本概念及其基本方法-12017-10-12 10:14:46

    生物分离是从生物材料、微生物的发酵液、生物反应液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关产品(如具有药理活性作用的蛋白质等)的过程,又称为下游加工过程。生物分离过程的主要特点:常无固定操作方法可循,生物材料组成非常复杂,分离操作步骤多,不易获得高...

  • 羊水细胞(amniotic fluid cell,AFC)染色体标本的制备2017-10-12 10:14:15

    一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养...

  • 肺泡上皮细胞的分离步骤2017-10-12 10:13:44

    1、取得完全无血液残留的肺脏: 实验前将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏。 2、消化肺组织: 常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶,现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但...

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