mTOR可对细胞外包括生长因子、胰岛素、营养素、氨基酸、葡萄糖等多种刺激产生应答。它主要通过PI3K/Akt/mTOR途径来实现对细胞生长、细胞周期等多种生理功能的调控作用。正常情况下，结节性脑硬化复合物-1(TSC-1)和TSC-2形成二聚体复合物，是小GTP酶Rheb(Ras-h...
NF-kappaB是一个大家族，包括：RelA(p65)、c-Rel、RelB、NF-kappaB1 (p50/p105)、NF-kappaB2 (p52/p100)。其中以RelA(p65)研究最为深入。 通常所说的是左边的经典途径，大致意思是这样：非激活状态下，RelA(p65)与一种名为IkappaB的蛋白结合，停留在胞浆中，...
p38 MAPK是1993年由Brewster等人在研究高渗环境对真菌的影响时发现的［8］。以后又发现它也存在于哺乳动物的细胞内，也是MAPKs的亚类之一，其性质与JNK相似，同属应激激活的蛋白激酶。目前已发现p38MAPK有5个异构体，分别为p38（p38）、p381、p382、p38、p38...
1、将高压的 PBS洗涤细胞瓶两次，弃PBS，倒置纸巾上吸干。 2、加入2 ml裂解液10permeabilization buffer 2 ml。 3、放入冰箱里裂解，平放，拧紧盖子，置摇床半小时，200 转/min。 4、收集裂解液至 1.5 ml EP管，分两管，12000 rpm，4 ℃离心，5 min使之沉淀。...
1、取得完全无血液残留的肺脏： 实验前将大鼠全身血液放净，取得完全无血液残留的肺脏。 2、消化肺组织： 常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶，现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但...
Tris饱和苯酚（Tris saturated phenol）也称Tris平衡酚（Tris balanced phenol），是添加了抗氧化剂8-羟基喹啉，tris pH8.0充分平衡的苯酚，呈黄色。常用于DNA抽提和纯化等。 重蒸酚是苯酚在182度蒸馏的组分。 tris配制方法： 1、取出重蒸酚，室温放置68度水...
（一）细胞总RNA的提取 1、6孔板细胞汇合度为90-100%时，取出无菌室，去其上清，用PBS洗两次后，每孔加TRIZOL试剂 1 ml，摇匀，无菌罩内消化3-5 min。 2、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中，加新开的氯仿0.2 ml，轻摇15 s。 3、室...
自身免疫性疾病主要特征是免疫系统在识别自我与非我时出现差错。尽管绝大多数自身免疫性T细胞在胸腺成熟过程中被调节分化后去除，但正常人体中总是带有部分自身反应性细胞。调节性T细胞是一种免疫调节细胞，它的作用是使机体能够通过调节外周免疫耐受来控制自...
一、原理 人外周血小淋巴细胞，通常都处在G1期（或G0期），一般情况下不进行分裂。如在培养液中加入植物血凝素（PHA），这种小淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞，进入有丝分裂。短期培养后，经秋水仙素处理，低渗和固定，即可得到大量的有丝分裂细胞。人体...
一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中，并继续生长、增值。因此，由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多，异倍性，有结构畸变，常支持阳性诊断。 二、用品和试剂 同外周血染色体制备。 三、操...