肝 脏 由于肝脏的生理代谢十分旺盛，因此外源基因在肝脏中的表达时间往往很短暂，而且表达产物的水平也较低。为减少出血，可从小静脉注入，然后在肝脏上施加电场，能显著增强基因的表达。 睾 丸 相对于其他的转基因方法，活体电穿孔法可使外源基因在睾丸中产...

电 压 电穿孔时在能量导入一定的情况下设计施加电压的值。电压过低或过高都会影响外源基因的表达。电压过低时，无法造成细胞膜表面状态的改变，因而外源D 不能进入细胞内。电压过高时，局部组织积聚过多热量，造成细胞的死亡或组织失去功能，即使外源基因导入...

1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用，并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单，在直流电场作用的瞬间，细胞膜表面产生...

肝素（heparin）属于糖胺聚糖（glycosaminoglycans，GAGs）类生化药物，是一类在结构上不均一、聚合程度上高度分散的硫酸多糖，一般指肝素钠。 低分子量肝素有下面俩种定义： 1．分子量在4000～6500道尔顿的肝素具有独特的抗凝特性称为低分子量肝素.与普通肝...

一、 试剂 1、 淋巴细胞分离液：避光4度保存，用前在37度水浴中加温。整个分离过程中，温度应控制在8-28度，温度过高或过低均影响分离质量。 2、 全培养基（用前配置）：RPM1640培养基，内含20%胎牛血清（Gibco）{56℃灭活30分钟}，1.6-1.8% 1M的HEPES，1.2%...

2006年日本京都大学山中伸弥领导的实验室在世界著名学术杂志《细胞》上率先报道了诱导多能干细胞（Induced Pluripotent Stem cells，iPS）的研究。他们把Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4这4种转录因子引入小鼠胚胎或皮肤纤维母细胞，发现可诱导其发生转化，产生的i...

一、成骨诱导体系： 1. 试剂 成骨诱导液：DMEM+10%FBS，双抗，谷氨酰胺，诱导因子： 地塞米松：通过促进Cbfal mRNA和Osterix mRNA的表达而促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化。 -甘油磷酸钠：可促进地塞米松对MSC的的诱导分化。 Vc：一种重要的营养素和氧化还原...

转染方案 一般原则：建立一套适当的转染方案；首先从一种标准方案开始，然后通过改变试剂/DNA的配比和复合物的剂量进行优化。 转染复合物的制备诸如转染试剂/DNA配比，离子强度，缓冲液pH值，以及温度等变量都会影响到转染复合物的组成和功能。质粒可用无菌水...

组织培养试剂 一般原则：优化您的细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并尽可能减少所用试剂的变更。 基础培养基培养基的成分包括营养物质（氨基酸，葡萄糖），维生素，无机盐，和缓冲物质。有些成分非常不稳定，因此如果在使用时不是新鲜，加入就...

转染是否成功的影响因素很多，如需要转染的细胞类型（对于困难的细胞系尤其如此），需要被转染的分子（DNA、RNA、寡核苷酸、蛋白质），转染试剂等。但无论在何种情况下，转染的成功均取决于转染效率、低细胞毒性以及重现性这几个要素。 细胞： 分裂细胞相比较...