从人关节软骨中分离软骨祖细胞 试剂和材料： 1.骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分； 2.链霉蛋白酶消化培养基：DMEM/F12（1：1）、5%的F、抗坏血酸 50g/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素（50mg/ml），0.2%（终浓度100g/ml）、链霉蛋白酶 70U/ml、HEP...

人软骨细胞的分化 试剂和材料： 1.分化培养基：DMEM/F12（1：1）、1%ITS（胰岛素、转铁蛋白、硒；V/V）、TGF-eta;1 1ng/ml、HEPES 10mmol/L； 2.胰蛋白酶/EDTA：胰蛋白酶（0.05%）和EDTA（0.53mmol/L）A配制； 3.A：无Ca2+，Mg2+的Dulbeccorime磷酸盐缓冲液；...

MSCs分化为脂肪细胞 试剂和材料： 1.完全培养基（CCM）：-MEM：-低限量基础培养基，含谷氨酰胺，无核苷酸或脱氧核苷酸；添加：20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经F杂交瘤纯化，非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100g/ml。过滤除菌。储存于4℃，不超过2周； 2.FDM（...

（3）NE+IFN-DMEM（-6M，50ng） NE---A液（1g/l，1mg/ml） 20.5l IFN-（25ng/l） 25 l DMEM UP TO 100 ml 过滤消毒，4℃保存 （4）低血清DMEM培养基（上室） （5）20%FBS-DMEM培养基（下室） 2、准备 （1）溶胶，4℃过夜（Thaw Matrigel at 4℃ overnight.）...

一、原理 Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上，能在DMEM培养基中重建形成膜结构，这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。 滤膜孔径一般为8um，而且膜孔都被Matrigel...

实验目的： 1．了解目镜测微计和镜台测微计的构造。 2．掌握用显微测微计测量微生物细胞大小的方法。 3. 了解血球计数板的构造、原理和使用方法。 4. 掌握应用血球计数板测定青霉菌孢子浓度的方法。 实验材料： 1．菌种 啤酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae...

实验步骤： 1、EB病毒液的制备 复苏B95.8细胞株，使用培养基为10% FCS RPMI-1640 逐步添加培养基至细胞长至对数生长期 细胞计数，调节细胞数量为110^6个/ml 在CO2培养箱中继续续培养10天，中间不换液 至第10天收集培养上清，1800rpm，4℃离心15分钟 0.22m滤器...

外源基因进入细胞主要有三种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法，实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入，但是由于前两者的效率低且伤害较大，所以现在除了对于一些特殊细胞系，一般的转染方法都利用脂质体。 利用...

c、显微镜下观察细胞完全松散开，就可以在你感兴趣的局部加培养基，并吸走你的可隆了呀； d、具体消化的时间，你注意摸索一下，如果在步骤2中显微镜下见细胞尚未完全松散开，可以再重复的，直到松散开，能够被吸走为止。 我的建议：1、在100mm dish中挑克隆，...

一、筛选之前确定G418浓度： 1、由于每种细胞对G418的敏感性不同，而且不同的厂家生产的G418有效成分的比重不同，一般1g的粉剂中有效的G418含量大约为 0.722g。 2、G418是新霉素的类似物，两者都是通过抑制核糖体的功能和蛋白质的合成而杀死细胞的。但是新霉...