(2)术前准备 取一根脐带(离体3个小时内,平均1小时,剪去夹伤部位) 2个50ML注射器,1个30ML注射器和1个10ML注射器 1个止血钳,2根插管,14号线2CM长,消毒巾,消毒手术刀和无菌手套 手术区域准备:一块床单和无菌手套封套 3 脐带手术操作和培养 (1)用手...
一、试剂和缓冲液配制 1、胎牛血清(氯化十六烷基吡啶) (1)解冻胎牛血清 (2)在56℃加热30分钟(脱补体作用,盖上瓶) (3)取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏 (4)在-20℃冰冻馏份 2、磷酸盐缓冲液(PBS) (1)无钙镁离子的100ML的PBS(10)...
我要用人纤连蛋白包被培养板养细胞,请问自己如何包被,有无其他方法可替代? 以10g/l的纤连蛋白(Fibronectin)于4℃包被培养板过夜,接种细胞就可以了。 我用罗氏的Fibronectin 1mg/瓶,说明书推荐:配成50ug/ml,包被用量5ug/平方厘米。室温下包被40分钟,然...
Q5.明胶包被后的培养瓶使用期的问题 A5.這個我不知道,但基本上是越快使用越好。由於包被的過程很快,所以我都是當天包被, 在等的過程中可以去做其他的事,包被即將完成的前20分鐘就開始處理細胞,等細胞收下來包被也就做好了, 馬上就用。 0.1%的明胶适合大...
培养板的包被及相关问题:为了适应不同的实验需要,可对培养板用不同的物质进行包被后使用,这其中有促进细胞黏附的,也有用于一些特殊检测需要的。不同的实验目的可能具体的方案亦不同,根据需要灵活掌握。 (一)多聚赖氨酸包被: 问:我要培养原代神经细胞培...
一、设备 无菌操作设备。 二、大型设备 CO2培养箱 恒温5%、10%CO2维持培养液中pH值 倒置显微镜:用于每天观察贴壁细胞生长情况 解剖显微镜,用于准确地取材 常温冰箱:-4℃,用于保存各种培养液,解剖液和鼠尾胶 低温冰箱:-20℃--80℃,用于储存血清酶,贵重...
软骨细胞的原代培养 龄新西兰乳兔(雌雄不限,共18只,分6次处理),溺死,置于75%酒精溶液中10分钟,拿入超净工作台,自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织,再次严格消毒,自外眦外将颧弓由根部剪断,暴露髁状突,去净髁状突表面软组织及软骨膜,以眼科剪剪...
羊水细胞普通培养法 1.一切操作均在严格无菌条件下进行,抽取羊水20~30ml,立即送往实验室。 2.将穿刺所得羊水离心(1500r/min)5分钟,而后在接种箱内吸出上清液留其他检查用,将剩下的0.5ml沉淀在管底的羊水细胞轻轻打匀,分别接种在两个盛有培养液的无...
1.G418的配制:取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中,加蒸馏水至10ml,过滤消毒,4度保存。 2.细胞培养:取待测培养细胞,制备成细胞悬液,按等量接种入多孔培养板中,培养6小时左右开始加药。 3.制备筛选培养基:在100ug/ml~1000ug/ml范围内确定几个梯度,比如先...
细胞培养中的边缘效应是指在使用多孔板的细胞培养中,在周边孔中的细胞会集中在孔的外侧,如左图所示(孔内白亮的为细胞集中的区域)。这种现象在实验中常用的96孔板中十分明显。 由于大多细胞的生长会受周围接触细胞的抑制,所以边缘效应导致边缘孔内细胞平...