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  • 原代贴壁细胞吉姆萨染色法2017-10-12 11:19:05

    原代贴壁细胞吉姆萨染色法 染液制备: 1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油; 2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒; 3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h; 4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内; 5. 取9份pH6....

  • 原代细胞骨架的染色方法2017-10-12 11:18:37

    原代细胞骨架的染色方法 微丝的显示方法步骤: 1. 用液漂洗盖片培养的原代细胞3次,每次30s; 2. 用2%的甲醛/液固定原代细胞3min; 3. 用0.5%的三硝基甲苯/处理3次,每次10min; 4. 漂洗3次; 5. 用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phalloidin)(1:10)...

  • 原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法2017-10-12 11:18:09

    原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法 原理: 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈...

  • 苏木精-伊红(HE)染色2017-10-12 11:17:39

    苏木精-伊红(HE)染色 染液制备: 1. 苏木精染液 (1) 称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中; (2) 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液; (3) 母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较...

  • 原代细胞甲基绿-哌咯宁法显示DNA和RNA2017-10-12 11:17:11

    原代细胞甲基绿-哌咯宁法显示DNA和RNA 基本原理: 甲基绿(methyl green)和哌咯宁(pyronin)均为碱性染料,因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷,易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷,易与单链RNA...

  • 原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法2017-10-12 11:16:06

    原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法 基本原理: 吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的荧光,DNA呈亮绿色,而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷,既可染活原...

  • 原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA2017-10-12 11:15:37

    原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA 基本原理: 显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂...

  • 四乙基罗丹明标记抗体﹠四甲基异硫氰酸罗丹明标记抗体2017-10-12 11:15:10

    四乙基罗丹明标记抗体﹠四甲基异硫氰酸罗丹明标记抗体 四乙基罗丹明标记抗体: 1.称取1g RB200及2g PCL5放在乳钵中于通风橱中研磨5min; 2.加入10ml无水丙酮,不断搅拌,5min后过滤,用滤液进行标记抗体。剩 余部分吸附在滤纸上,于4℃干燥保存; 3.量取一定...

  • FITC标记抗体-改良法2017-10-12 11:14:44

    FITC标记抗体-改良法 试剂: 1.0.01mol/L pH7.2 配方。将NaCl 18g、Na2HPO4 1.15g、KH2PO4 0.2g, 溶于2000ml三蒸水中,调整pH至7.2; 2.0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液配法。量取0.5mol/L Na2CO3(5.3%)10ml 加入0.5mol/L NaHCO3(4.2%)90ml中,充分混合后,...

  • FITC标记抗体-Marsshall氏法2017-10-12 11:14:15

    FITC标记抗体-Marhall氏法 材料: 抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(2550ml)、冰及冰槽(或1000ml烧杯)、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)、pH7.2或8.0的0...

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