显微吸收光度测量需满足朗伯-比尔定律条件，待测物质需为均质，但生物学物质很少是均质的，而且显微镜成像过程中，经过光路系统各界面多次折射反射后会导致测量中的分布误差、闪烁误差、系统误差等，影响测量精度。所以除校正系统至最佳状态外，常用双波长法...

流式细胞术所测的细胞样品要求细胞呈单个分散状态，其中细胞团块，细胞碎片尽可能少，分散过程中细胞的活性不受到明显的损害，以保证下一步的荧光染色处理。所以在实际应用时，一个理想的单个细胞分散的细胞悬液样品的制备往往是两种或多种方法的结合使用，才...

分析细胞学是从定量的角度对细胞的各种形态学参数、生物学特征、细胞生化成分的组成及含量以及细胞的各种功能等进行研究，将以往各种细胞学技术从定性、定位进一步发展到定量的研究，获得定量的测量数据，以更客观地揭示生命活动的规律。分析细胞学技术的发展...

显微分光光度术（microspectrophotometry， MSP）实质上是显微镜技术和分光光度技术的结合。它以物质分子的光吸收、荧光发射和光反射特性作为测量基础，可以对细胞内的某些重要的生物分子（如 DNA、RNA、蛋白质等）的含量进行定量测试，是组织化学和细胞生物...

广义的细胞工程（cell engineering）指所有应用于生物学和医学的、以细胞为操作对象的技术手段，其中也包括细胞培养。一般地说，细胞工程主要指应用各种手段对细胞不同结构层次(整体、细胞器、核、基因等)进行改造，如进行细胞融合、核移植、基因转移等，以获...

脂质体（LR）试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物（1：1）。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。 用LR进行转染时，首先需要优化转染条件，...

一、细胞转染途径 转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于物理介导技术；化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法，有较为原始的原生质体转染，...

[实验目的] 1 了解细胞转染技术原理和基本方法 2 磷酸钙沉淀法的基本技术要点 [实验原理] 磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法，磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮...

一、实验材料 1、宿主细胞CHO（贴壁细胞） 2、脂质体LIPOFECTAMINE 2000（invitrogen公司） 3、6孔细胞培养版 4、无血清培养基OPTI-MEM（GIBICO） 5、转染级质粒 二、实验步骤 invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔......板的实验体...

肝 脏 由于肝脏的生理代谢十分旺盛，因此外源基因在肝脏中的表达时间往往很短暂，而且表达产物的水平也较低。为减少出血，可从小静脉注入，然后在肝脏上施加电场，能显著增强基因的表达。 睾 丸 相对于其他的转基因方法，活体电穿孔法可使外源基因在睾丸中产...