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琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）检测DNA2017-10-13 16:15:39
原理：琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，可作为电泳支持物，适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离，与标准DNA片段进行对照，就可获知该样品分子量大...
核酸蛋白转移电泳及杂交（Southern Blot、Northern Blot和Wester2017-10-13 16:15:03
(10)倒去预杂交液，加入含探针的杂交液封口，42℃ 6h或过夜。 (11)取出转移膜，按以下条件洗膜 1SSC，0.1%SDS室温215分钟 0.25SSC，0.1%SDS,42℃ 215分钟，气中干燥。 (12)将杂交后的膜曝光于X光片，暗盒中放射自显影2～7天，-70℃。 (13)X片显影、定影，然...
核酸蛋白转移电泳及杂交（Southern Blot、Northern Blot和Wester2017-10-13 16:14:28
一、DNA Southern Blot及杂交本技术可用于基因组DNA特定序列定位，尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性，对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值，其过程包括：样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂糖凝胶电泳分离、分...
核酸凝胶电泳观察法2017-10-13 16:13:54
实验原理：琼脂糖是海藻中提取的线状高聚物，不同浓度的琼脂糖密度不同，一般PCR产物使用2%浓度，0.5Kb-10Kb的DNA使用1%浓度，基因组DNA使用0.3%-0.7%浓度；不同大小的核酸在同一浓度的凝胶中迁移率不同，因为分子越大其受琼脂糖的阻力越大，迁移率与碱基对的...
琼脂糖凝胶电泳检测DNA2017-10-13 16:13:18
实验原理根据DNA分子量不同，采用外加电场使其分开，用EB嵌入DNA分子后在紫外下显色。琼脂糖凝胶电泳是利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 1）在电场的作用下及中性pH的缓...
DNA片段的琼脂糖凝胶电泳2017-10-13 16:12:32
原理琼脂糖凝胶电泳是重组DNA研究中常用的技术，可用于分离，鉴定和纯化DNA片段。不同大...
琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)2017-10-13 16:11:57
琼脂糖是从琼脂中提取出来的，是由D-半乳糖和3、6-脱水-L-半乳糖结合的链状多糖，含硫酸根比琼脂少，因而分离效果明显提高。琼脂糖电泳具有以下优点：①琼脂糖含液体量大，可达98％～99％，近似自由电泳，但样品的扩散度比自由电泳小，对蛋白质的吸附极微；...
DNA片段的琼脂糖凝胶电泳原理和操作步骤2017-10-13 16:11:21
原理琼脂糖凝胶电泳是重组DNA研究中常用的技术，可用于分离，鉴定和纯化DNA片段。不同大...
成功做好酶切的建议与问题解答2017-10-13 16:10:46
1.如何做好酶切？该问题看似什么简单： DNA中加上酶，然后保温一段时间就可以了。但是在实际操作过程中，我们不断听到：切不动，装不上。问题在什么地方？能系列生产限制性内切酶的公司国际上，就那么几个，位列前3 的是NEB, Fermentas, SibEnzyme。这些公司...
MassPREP自动酶切仪操作步骤和注意事项2017-10-13 16:10:06
MassPREP自动酶切仪操作步骤一开机前检查： 1 检查仪器台面（DECK）上所有的实验材料（Labware）。 2 检查SystemWater 水桶的水位。 3 检查恒温循环水浴（Chiller）水箱的水位，并定期更换或填充Chiller 中的循环水。 4 倒掉废液桶中的废液。二开机步骤：...