原理 限制性核酸内切酶能特异地识别和切割双链DNA中的碱基顺序,本实验中所用的pBS-SK质粒分子总长约2.9kb,经酶HindⅢ切割后,闭合环状质粒DNA即变成线性DNA分子。 不同大...
[实验原理] 电泳是现在用于分离和纯化DNA片段的最常用技术。当装备一块胶即包含电解质的多孔支持介质并把它置于静电场中,DNA分子将向阳极移动,这是因为DNA分子沿其双螺旋骨架两侧带有含负电荷的磷酸根残基。当DNA长度增加时,来自电场的驱动力和来自凝胶的...
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一、 实验目的 通过本实验学习PCR反应的基本原理,掌握PCR的基本操作技术以及琼脂糖凝胶电泳技术。 二、 实验原理 PCR用于扩增位于两端已知序列之间的DNA区段,即通过引物延伸而进行的重复双向DNA合成。基本原理及过程如下: PCR循环过程中有三种不同的事件发...
单细胞凝胶电泳分析(single cell gel eletrophoresis,SCGE)是由Ostling等(1984)首创,后经Singh等(1988)进一步完善并逐渐发展起来的一种快速检测单细胞 DNA损伤的实验方法,适用于多种细胞,能够灵敏地检测DNA断裂,在检测诱变剂、射线等对DNA的损伤、...
一、原理 琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶是分离和纯化DNA片段的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离小分子的核酸;琼脂糖凝胶孔径较大,被应用于大分子核酸的分离和纯化。在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中,DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比。当用低...
一、原理 琼脂糖凝胶具有分子筛效应。在中性ppH值的电泳缓冲液体系中,DNA分子由于带负电荷,所以在电场作用下由负极向正极泳动。由于DNA分子的大小和构型不同,在相同的时间内迁移至不同的位置。凝胶经溴化乙锭染色后,紫外检测仪下观察,即可看见DNA片段按...
一、实验目的 学习酚、氯仿抽提去除蛋白质的基本方法 了解质粒DNA的抽提方法 学习掌握琼脂糖凝胶电泳的方法 熟练取液枪的使用方法 二、实验原理 在DNA的粗提液或其他的DNA反应体系中,一般都混有蛋白质、寡糖苷酸等杂质。酚和氯仿可以使蛋白质变性,离心后变...
目的 学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。 2.原理 限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱...
实验目的 学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大...