3、电泳:电压<10V/cm,电泳至溴酚兰移出样品槽到凝胶板的2/3距离时,关闭电源。 4、取出凝胶块,置紫外透射反射分析仪上观察,即可见桔红的DNA区带。 【注意事项】 1、加样时枪头不要碰坏孔壁,否则DNA带型不整齐。大多情况下,加样时不必更换枪头,可在阴...
二、核酸电泳的指示剂与染色剂 【指示剂】 电泳过程中,常使用一种有颜色的标记物以指示样品的迁移过程,核酸电泳常用的指示剂有两种:溴酚兰,呈蓝紫色;二甲苯青,呈蓝色。溴酚蓝分子量为670道尔顿,在不同溶液凝胶中,迁移速度基本相同,其分子筛效应小,...
核酸是带均匀负电荷的分子,在电场中向正极移动,不同大小和构象的核酸分子的电荷密度大致相同,在自由泳动时,各核酸分子的迁移率区别很小,难以分开。以适当浓度的凝胶介质作为电泳支持介质,具有分子筛效应,使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较...
1 .核蛋白的提取 ①用细胞刮子刮取RAW264.7 细胞与VSMC ,移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS 洗两遍,于4 ℃ , 5000g 离心3min ,沉淀细胞。③加5 倍细胞体积的冰浴缓冲液A 洗细胞一次,于4 ℃ ,5000g 离心3 min 沉淀细胞. ④加3 倍细胞体积的冰浴缓冲液A...
一、实验目的 琼脂糖凝胶电泳是常用的检测核酸的方法,具有操作方便、经济快速等优点。本实验学习DNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术,掌握有关的技术和识读电泳图谱的方法。 二、实验原理 琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳...
【原理】 DNA的电泳原理与蛋白质电泳基本相同。在pH高于其pI时,DNA分子带负电荷。在直流电场中DNA向正极泳动。不同的DNA分子因电荷数、构象和分子量大小的不同,在同一电泳系统中的泳动速度有差异,达到分离的目的。电泳后的凝胶浸泡于溴化乙锭染料中,溴化...
原 理 琼脂糖凝胶电泳是重组DNA 研究中常用的技术,可用于分离,鉴定和纯化DNA 片段。不同大...
1.目的 学会常用的DNA琼脂糖凝胶电泳、。 2.原理 DNA双螺旋分子骨架两侧带有含负电荷的磷酸根,在电场中会向正极方向移动。不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同,表现为不同的迁移率而被分开。 3.器材 电泳仪,水平凝胶电泳槽和梳子及其制胶模块,250...
实验原理 琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应,达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场...
仅条带看不清,连marker都看不清。牢记,否则你会认为自己的实验失败。 我还认为是EB加少了。 2 1%agrose 凝胶的配制, 50*TAE BUFFER.稀释成1。0.3g 加30ml,微波炉中 40s, 不能太长,否则液体会蒸发, 量会减少。 等待融化的胶冷却之后,再加1ul 的EB.扑胶...