WS/T 884‑2026《分枝杆菌感染实验诊断标准》要点解读

发布：国家卫健委，2026‑05‑25 发布，2026‑11‑01 实施；推荐性卫生行业标准。 适用范围：医疗机构实验室分枝杆菌实验诊断，不含麻风分枝杆菌；覆盖结核分枝杆菌复合群（MTBC）、非结核分枝杆菌（NTM）；包含标本管理、涂片、培养、菌种鉴定、分子检测、药敏、质量控制、结果报告全流程。 起草单位：同济医院、武汉市肺科医院、北京胸科医院、中国疾控中心、上海市肺科医院等。 ⚠️本内容为标准学习摘要，仅供检验、临床、教学参考，实际工作以官方 PDF 文本为准，不替代临床诊疗。

一、总体原则

1. 分离培养为实验诊断金标准；涂片、核酸为快速筛查手段，不能替代培养中华人民共...。
2. 实验室宜同时开展抗酸涂片 + 核酸检测；有条件开展培养‑鉴定‑药敏；无条件应规范外送标本中华人民共...。
3. 方法学使用前完成性能验证，质量控制遵循 GB/T 22576.6、WS/T 807 系列要求中华人民共...。
4. 区分结核分枝杆菌复合群 MTBC 与非结核分枝杆菌 NTM；涂片只能报抗酸杆菌阳性，不能直接判定为结核。

二、标本采集、转运与拒收规则

1. 常见标本类型

• 呼吸道：痰液（优先干酪 / 脓血性痰）、支气管肺泡灌洗液（灌入量 60‑100 mL）；
• 无菌体液：胸水、腹水、脑脊液、关节液；
• 组织、脓液；血液用于播散性分枝杆菌感染；

拒收：干燥拭子、标本量不足、明显腐败污染标本。

2. 转运要求

• 室温 / 2‑8 ℃冷藏，避免冷冻；尽快送检；
• 高风险标本严格生物安全二级 BSL‑2 操作。

三、显微镜检查（抗酸染色）

1. 除血液外，分枝杆菌检测标本均宜做抗酸染色涂片镜检中华人民共...。
2. 染色方法：萋‑尼氏染色、荧光抗酸染色；荧光法灵敏度更高。
3. 报告分级：按抗酸杆菌数量分级报告；涂片阳性仅提示存在抗酸杆菌，不能区分 MTBC/NTM，必须后续鉴定。
4. 局限性：敏感度低，阴性不能排除分枝杆菌感染。

四、分枝杆菌分离培养

1. 标本前处理：碱处理（NaOH）去除杂菌污染；无菌体液可不做去污染处理。
2. 培养基：固体罗氏 (L‑J) 培养基、液体肉汤培养体系；固液联合可提升检出率。
3. 培养周期：固体培养阴性必须满8 周方可报告阴性；液体培养按仪器规程；观察记录菌落形态、生长速度。
4. 快生长 NTM 定义：固体培养基≤7 d出现肉眼菌落；慢生长＞7 d。
5. 培养阳性后必须开展菌种鉴定，区分 MTBC 与 NTM。

五、菌种鉴定

1. 初筛鉴定（区分 MTBC / NTM）

1）MPT64 抗原检测：培养物 MPT64 阳性提示 MTBC；MPT64 阴性、抗酸阳性高度怀疑 NTM；注意 MPT64 基因突变可出现假阴性中华人民共...。 2）PNB 选择性培养基试验辅助鉴别。

2. 种水平精准鉴定（NTM 需要鉴定到种）

可选方法：

• MALDI‑TOF 质谱；
• 一代 Sanger 测序（16S rRNA、hsp65、rpoB）；
• 二代靶向测序 tNGS、全基因组 WGS。

要求：临床 NTM 尽量鉴定至种，不同 NTM 药敏谱、治疗方案差异显著。

六、核酸分子检测（标准重点更新）

核酸检测分为低、中、高复杂度三级系统，附录 A、附录 B 给出技术对比表中华医学期...。

1. 技术清单：实时荧光 PCR、LAMP 等温扩增、线性探针、基因芯片、tNGS、WGS、mNGS、纳米孔测序等中华医学期...。
2. 检测目标：病原体核酸 + 耐药基因（利福平、异烟肼等）。
3. 临床定位
   • 低复杂度：POCT 类，适合初筛；
   • 中等复杂度：Xpert MTB/RIF 等，临床常规主力；
   • 高复杂度：WGS、mNGS，用于疑难、无菌体液、常规检测阴性病例，不推荐作为普通疑似结核一线筛查。
4. 关键判读要点
   • 核酸阳性：提示存在靶标核酸，不等同活菌；结合涂片、培养、临床综合判读；
   • 核酸阴性：不能排除分枝杆菌感染，受标本菌载量、抑制物影响；
   • mNGS 检出分枝杆菌序列：区分致病、定植、环境污染，必须结合临床与其他实验室证据，不能单独作为确诊依据。
5. 耐药基因型检测：基因型结果必要时表型药敏复核。

七、药物敏感性试验 AST

1. 分为表型药敏、基因型药敏；表型为金标准。
2. MTBC：检测一线（异烟肼、利福平、乙胺丁醇、吡嗪酰胺）、二线抗结核药物；
3. NTM：不同菌种药敏谱差异极大，不使用统一药敏板，根据菌种选择药敏药物组合；
4. 仅纯培养菌株可开展表型药敏；不能直接用原始标本做表型药敏。

八、免疫学检测（潜伏感染）

γ‑干扰素释放试验 IGRA、结核菌素皮肤试验 TST 用于结核潜伏感染筛查；不能区分活动性结核与潜伏感染，不可单独作为活动性结核病确诊依据。

九、质量控制与生物安全

1. 涂片、培养、分子检测均设置阴阳质控；定期参加室间质评 EQA。
2. 所有分枝杆菌活菌操作在BSL‑2 实验室；气溶胶风险管控；废弃物按感染性废物处置。

十、检验报告规范（标准强制要素）

1. 标本信息、标本质量；
2. 涂片：抗酸杆菌分级结果；
3. 培养：生长 / 阴性、生长时间、菌落特征；阳性必须报告菌种（MTBC/NTM，NTM 报告到种）；
4. 核酸：检测方法、靶标、Ct / 结果；耐药基因结果；
5. 药敏：药物、MIC 值、敏感 / 中介 / 耐药；
6. 明确书写方法局限性；
7. 提示：涂片阳性≠结核；核酸阳性不等于活菌；NTM 需要结合临床判断是感染还是定植。

十一、标准核心警示要点

1. 抗酸涂片只能报抗酸杆菌，严禁直接报告 “找到结核杆菌”。
2. 培养阳性必须做菌种鉴定，不能默认就是结核分枝杆菌。
3. NTM 可以是定植，实验室结果需要临床结合影像、症状综合区分感染 / 定植。
4. mNGS、WGS 属于高复杂度检测，有明确适用场景，不适合普遍筛查。
5. IGRA/TST 只提示结核感染免疫状态，不能确诊活动性结核