《抗结核新药早期杀菌活性研究方法专家共识》（2021，北京胸科医院 / 中国防痨杂志）摘译

一、EBA 定义与核心价值

1. 定义

• 狭义 EBA：治疗最初 2 天内，每日每毫升痰液中结核分枝杆菌（MTB）活菌数（CFU）log₁₀平均下降速率，反映对快速代谢、活跃增殖MTB 的杀菌力。
• 广义 EBA：延长至7～14 天，评估全周期杀菌活性，可反映对低代谢 / 持留菌的作用。

2. 核心价值

• 快速评价单药 / 新方案早期杀菌强度，筛选有潜力候选药。
• 探索 ** 剂量–效应 / 药代–药效（PK/PD）** 关系，指导后续剂量选择。
• 同步评估安全性，为 Ⅱb/Ⅲ 期试验提供依据。

二、研究设计核心规范

1. 研究类型与设计

• 前瞻性，可采用开放、单盲或双盲；优先随机对照，设阳性对照（如异烟肼）与安慰剂 / 空白对照。
• 模式：单药短期治疗（7～14 天），除非体外提示高耐药风险。

2. 入排标准（关键）

• 入选：18～65 岁、初治、痰涂片阳性（≥2+）、免疫正常、无肺外结核、可完成试验并后续接受标准治疗。
• 排除：严重并发症、咯血、播散性结核、入组前 6 个月用抗结核药、肝肾功能异常、妊娠 / 哺乳、药物过敏。

3. 样本量与周期

• 样本量：每组12～15 例（保证统计效能）。
• 周期：常规7～14 天；EBA(0～2) 反映快速杀菌，EBA(0～7/14) 评估全周期活性。

4. 给药与对照

• 试验药：固定剂量 / 梯度剂量（探索剂量反应）。
• 阳性对照：异烟肼（300 mg/d） 为标准参照；空白 / 安慰剂对照用于评估基线波动。

三、标本采集与检测方法（金标准）

1. 痰标本采集

• 时间：基线（d0）、d1～d7/d14，每日晨起深咳痰，≥10 mL / 次。
• 处理：2 小时内冷藏（2～8℃），48 小时内处理；均质化、去污染（N - 乙酰 - L - 半胱氨酸 / NaOH）。

2. 核心检测指标

（1）固体培养 CFU 计数（金标准）

• 培养基：7H11 / 罗氏培养基，37℃培养3～4 周。
• 计数：菌落数 30～300 CFU/mL 有效；结果以log₁₀CFU/mL 表示。

（2）液体培养 TTP（阳性报警时间）

• 方法：MGIT 960/BACTEC，记录阳性时间。
• 意义：TTP 延长与 CFU 下降一致，更敏感、快速，可替代或补充 CFU。

（3）替代指标（新兴）

• TB-MBL（RT-qPCR）：检测 16S rRNA，快速定量活菌，缩短检测周期。
• 分子药敏 / 耐药监测：早期发现耐药突变。

四、统计分析与终点定义

1. 分析人群

• ITT 集：接受≥1 剂药物；PP 集：完成全程、标本合格（优先用于疗效）。

2. 核心终点

• 主要终点：EBA(0～X)（X=2/7/14）= log₁₀CFU/mL 日平均下降值。
• 次要终点：EBA(0～2)（快速杀菌）、EBA(2～X)（后期杀菌）、TTP 变化、痰菌阴转时间 / 比例、PK 参数。

3. 统计方法

• 计算log₁₀CFU/mL 均值 ±SD，线性 / 双线性回归拟合下降曲线。
• 组间比较：ANOVA / 非参数检验；剂量反应用回归分析；安全性用描述性统计。

五、质量控制与影响因素

1. 质控要点

• 标本：标准化采集、运输、处理，避免污染 / 活菌丢失。
• 培养：严格无菌操作，平行接种、重复计数，定期质控菌株验证。
• 数据：双人录入、核查，缺失值合理填补。

2. 关键影响因素

• 患者：免疫状态、痰菌量、病变范围。
• 药物：剂量、PK、组织穿透性、杀菌谱。
• 操作：标本质量、培养方法、计数误差。

六、安全性与伦理

• 全程监测不良事件（AE），重点：肝肾功能、血液学、胃肠道、神经系统。
• 试验结束后立即启动标准抗结核治疗，确保患者获益。
• 遵循GCP 与伦理，签署知情同意，保障权益。

七、关键推荐（极简版）

1. EBA 研究为抗结核新药早期开发核心环节，周期7～14 天，每组12～15 例。
2. 入组：初治、痰涂片阳性、免疫正常成年肺结核患者；排除肺外结核与近期用药者。
3. 检测：以固体培养 CFU为金标准，液体培养 TTP为优选替代；可联合分子方法。
4. 终点：EBA(0～2) 反映快速杀菌，EBA(0～14) 评估全周期活性；用log₁₀CFU 下降速率定量。
5. 统计：ITT/PP 集分析，线性回归拟合，ANOVA组间比较；严格标本与培养质控。
6. 安全：全程监测 AE，试验后立即标准治疗，遵循伦理与 GCP。