2020 BSH指南：G6PD缺乏的实验室诊断

一、核心检测策略（阶梯式流程）

1. 初筛试验（快速、低成本，适合人群筛查）

• 荧光斑点试验（Fluorescent Spot Test）：首选初筛；基于 G6PD 催化 NADP→NADPH，紫外下观察荧光强度；无荧光 = 严重缺乏，荧光弱 = 部分缺乏，荧光正常 = 不缺乏。
• 染料脱色试验（Dye Decolourisation Test）：次选初筛；通过亚甲蓝 / 氯化硝基四氮唑蓝（NBT）褪色判断酶活性；不褪色 = 缺乏。
• POC 快速检测：适合基层 / 现场；结果需经定量酶活性验证BSH。

2. 确诊试验（定量酶活性检测，金标准）

• 检测方法：速率法（紫外分光光度法），检测 NADPH 生成速率，结果以IU/g Hb报告。
• 关键质控要求
  • 严格控温（反应温度依赖）。
  • 每批次设正常 / 缺陷质控品（优先商用质控）。
  • 白细胞需去除（WBC 含高 G6PD，干扰结果）。
  • 同时测定 Hb 浓度，结果以活性 / 血红蛋白校正。
  • 建立实验室本地参考范围。
   
• 结果分级（成人，静脉血）
  • 正常：>6.0 IU/g Hb
  • 部分缺乏：1.0–6.0 IU/g Hb（多为女性杂合子、非洲型变异）
  • 严重缺乏：<1.0 IU/g Hb（地中海型、常见溶血型）
   

3. 分子诊断（补充 / 疑难确诊）

• 适用人群：近期输血者、女性杂合子、溶血后网织红升高致酶活性假正常、需明确变异型、家系验证。
• 方法：DNA 测序（阳性可独立确诊）、基因芯片 / 靶向测序；未检出突变不能排除缺乏，需以定量酶活性为准。

二、关键临床解读要点（避免假阴性 / 假阳性）

1. 溶血发作期检测陷阱
   • 年轻红细胞 / 网织红细胞 G6PD 活性显著高于衰老红细胞；溶血期 / 溶血后 2–3 个月内检测易假正常。
   • 临床高度怀疑时，溶血停止后至少 2–3 个月复查。
    
2. 女性杂合子诊断难点
   • 莱昂化致红细胞嵌合（正常 + 缺陷）；单测酶活性常正常 / 临界，需结合 G6PD/6PGD 比值或分子检测。
    
3. 其他干扰因素
   • 地中海贫血（低 MCH<25 pg）：酶活性常假性升高，临界值需谨慎。
   • 近期输血：输入正常红细胞可掩盖缺陷，输血后至少 3 个月再检测。
    

三、特殊人群检测建议

• 新生儿：初筛阳性需定量酶活性 + G6PD/6PGD 比值确认；比值≤1.0 = 异常，1.0–1.3 = 可疑，>1.3 = 正常。
• 男性 hemizygote：初筛 + 定量即可确诊。
• 女性杂合子：优先定量 + 比值 + 分子检测联合判断。

四、检测流程总结

1. 临床怀疑→初筛试验（荧光斑点 / 染料脱色）。
2. 初筛阳性 / 临界→定量酶活性（速率法）。
3. 定量临界 / 女性 / 溶血后 / 输血后→分子诊断 + 复查酶活性。
4. 最终诊断以定量酶活性为核心，分子检测为补充。