胎儿新生儿溶血病实验室检测专家共识（2021，中国输血协会）

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一、核心定义与背景

• HDFN：母婴血型不合，母体产生 IgG 类同种抗体经胎盘进入胎儿，引发胎儿 / 新生儿红细胞破坏，以ABO、Rh 血型不合最常见，其他如 MNS、Kell、Kidd 等系统也可致病。
• 共识目标：统一检测项目、方法、时机与质控，提升国内实验室检测水平，减少漏诊与过度干预。

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二、检测对象与标本要求

（一）检测对象

• 有不良妊娠史、HDFN 史、RhD 阴性、不规则抗体阳性、稀有血型的备孕 / 妊娠女性。
• 申请单需标注：流产 / 妊娠 / 输血史、抗‑D 免疫球蛋白使用情况。

（二）标本要求

• 孕妇 / 配偶 / 新生儿：EDTA 抗凝血 3–5 mL；新生儿可用脐血。
• 非侵入性 cff‑DNA 检测：妊娠≥16 周孕妇外周血 5–8 mL（推荐）。
• 侵入性检测：绒毛膜取样 / 羊水穿刺（慎用）。

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三、产前检测方案（核心流程）

（一）基础检测（妊娠 8–12 周建档）

1. ABO+RhD 血型鉴定：正反定型确认 ABO；RhD 初筛 + 阴性确认；无法确证阳性按阴性管理。
2. 不规则抗体筛查：微柱凝胶抗人球蛋白法；阴性者28 周复查（可提高检出率约 35%）。
3. 抗体鉴定：筛查阳性时，鉴定特异性（抗‑D、抗‑E、抗‑A/B 等）。
4. 胎儿血型预测：推荐cff‑DNA 非侵入性检测（≥16 周）；无法检测时做父亲血型检测。

（二）抗体效价检测（关键风险分层）

1. IgG 抗‑A/B（ABO‑HDFN）

• 方法：巯基试剂（2‑Me/DTT）破坏 IgM，微柱凝胶抗人球蛋白法。
• 风险分层（发病率）：
  • ＜64：4.01%（低风险）→28 周复查
  • 64–127：18.87%（中风险）→持续监测
  • 128–255：51.27%（高风险）→cff‑DNA+MCA‑PSV
  • 256–511：74.20%（高风险）→MCA‑PSV + 血浆置换
  • ≥512：92.13%（极高风险）→宫内输血 / 换血 / 提前分娩
   

2. IgG 抗‑D（Rh‑HDFN）

• 风险分层（发病率）：
  • ＜16：5.40%（低风险）→监测
  • 16–31：33.33%（中风险）→监测
  • 32–63：81.82%（高风险）→cff‑DNA + 监测
  • 64–127：92.10%（极高风险）→MCA‑PSV + 宫内干预
  • ≥128：95.65%–100%（极高风险）→积极干预
   

3. 其他抗体（抗‑E、抗‑c、抗‑M 等）

• 个案为主，效价与风险关系不明确，需结合临床与 MMA 评估。

（三）功能学评估（MMA 试验）

• 单核细胞单层试验：评估抗体临床致病性；＞20% 活性提示高风险（95% 需治疗），＜20% 提示低风险（83% 无需治疗）。

（四）检测频次（阳性孕妇）

• ＜28 周：1 次 / 4 周
• 28 周至分娩：1 次 / 2 周

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四、产后检测方案（确诊依据）

（一）标本

• 新生儿静脉血或脐血。

（二）核心三项试验

1. 直接抗人球蛋白试验（DAT）：红细胞是否被抗体致敏（阳性提示溶血可能）。
2. 游离抗体试验：血清中是否存在针对新生儿红细胞的抗体。
3. 抗体放散试验：从红细胞上洗脱并鉴定抗体特异性（确诊金标准）。

（三）辅助检测

• 血常规（Hb、网织红细胞）、胆红素（总 / 间接）、肝肾功能。

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五、胎母出血（FMH）检测

（一）适用场景

• RhD 阴性孕妇、分娩 RhD 阳性新生儿、侵袭性操作 / 产前出血后。

（二）方法与意义

1. 酸洗脱试验（KBT）：筛查，胎儿红细胞≤3% 为正常；≤2 mL 用 500 IU 抗‑D 即可。
2. 流式细胞术：定量，＞2 mL 时精确计算出血量，指导抗‑D 剂量（500 IU 清除约 4 mL 胎儿红细胞）。

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六、质量控制要点

• 试剂：使用国家批准、检定合格的单克隆抗体与谱细胞。
• 方法：优先微柱凝胶抗人球蛋白法，减少试管法人为误差。
• 质控：效价检测以 ** 国家参考品（抗‑D，1:64）** 为室内质控；平行对照历史标本。
• 报告：明确抗体特异性、效价、风险等级与临床建议。

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七、关键推荐总结

1. 全员筛查：所有孕妇 8–12 周做 ABO/RhD + 不规则抗体筛查，阴性 28 周复查。
2. 精准分层：以 IgG 抗‑A/B、抗‑D 效价 + MMA+MCA‑PSV 综合评估风险。
3. 非侵入优先：cff‑DNA 检测胎儿血型，减少侵入性操作与不必要预防用药。
4. 产后确诊：三项试验 + 放散试验鉴定抗体，结合临床确诊 HDFN。
5. FMH 量化：RhD 阴性孕妇分娩后常规检测，指导抗‑D 精准注射。