目的： 1．学习SDSPAGE测定蛋白质分子量的基本原理。 2．掌握垂直板型电泳的基本操作技术。 二、原理： 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。 1967年，Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺凝胶系统中加...

指示染料是做为电泳时迁移的可见标志。对于碱性缓冲系统，一般用溴酚蓝或酚红（通常每管加0.005毫升0.1%的染料溶液）。对于酸性缓冲液系统，一般用甲基绿或次甲基蓝。指示染料可直接加在玻璃中或上电极槽的缓冲液中，也可与样品液混合。 本实验样品液准备：取...

上述各贮备液都需冷藏（4℃）。尤其是C、D两贮液，由于Acr及Bis易水解生成丙烯酸和NH3，冷藏也只能保存12月。如 PH超过5.2，即失效。 2．凝胶的制备： （1）将内径0.5cm的玻管切成710cm长，切口磨光，洗液浸泡后，水洗净烘干。 （2）分离胶的制备及预电泳：于...

（二）聚丙烯酰胺凝胶的性能及制备原理 1．性能 聚丙烯酰胺凝胶的机械强度好，有弹性，透明，相对地化学稳定，对pH和温度变化较稳定，在很多溶剂中不溶，是非离子型的，没有吸附和电渗作用。原料成分要采用高纯度制品，通过改变浓度和交联度，可以控制孔径变...

一、目的： 1．学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。 2．掌握聚丙烯酰胺园盘电泳的操作技术。 3．比较醋酸纤维薄膜电泳与本法分离血清蛋白质的效果。 二、原理： （一）盘状电泳原理 盘状电泳是在区带电泳原理的基础上，以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶作为支持物，...

一、原理 细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰...

一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液；1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液，PH8.8；1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液，PH6.8；电泳缓冲液，PH8.3；10%SDS溶液；10%过硫酸铵溶液；样品处理液；染色液；脱色液；电泳玻璃板，电泳电源架，电泳槽，电泳仪等；蛋白Mark。 二...

[实验步骤] 一般先制分离胶，再在分离胶上面制作浓缩胶。将贮液提前由冰箱中取出，达到室温后，按上表的比例配制工作溶液。 1、分离胶的制备 先在一只烧杯按比例加入分离胶原液1号、2号贮液和蒸馏水，在另一只烧杯中加入3号贮液，将上述两烧杯均置于真空干燥...

目的与原理] 掌握一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的方法，并用此法进一步分析血清蛋白的组成。 1、聚丙烯酰胺凝胶 聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺（Acr）、NN甲叉双丙烯酰胺（Bis），在催化剂过硫酸铵（ammonium persulfate (NH4)2S2O8 简称AP）或核黄素（ribofavi...

4．加样 作为分析用的PAGE加样量仅需几微克，2-3ul血清电泳后就能分出几十条蛋白区带。为防止样品扩散，应在样品中加入等体积40%蔗糖（内含少许溴酚兰）。用微量注射器取5ul上述混合液，通过缓冲液，小心地将样品加到凝胶凹形样品槽底部，待所有凹形样品槽内...