[实验原理] 在一个PCR 体系中同时扩增多个基因座的方法叫做复合扩增(Multiplexing PCR)。STR的复合扩增增加了单次检测的信息量,提高了个人识别率,同时可降低成本和检材的消耗,因此显示出重要的法医学应用价值。其基本原理就是利用基因座内等位基因长度的...
(4)引物的熔点温度(Tm值)要适当。Tm值与引物的碱基组成和长度有关;PCR引物的GC/AT应与要扩增的模板DNA相当或略高些。一般熔点温度以大于55℃为宜。 (5)引物的3,末端必须与模板严格互补,而5,末端的要求可灵活些。 (6)目前在引物选择中已广泛应用计...
一、实验原理 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一种体外核酸扩增系统,其原理类似DNA分子的天然复制过程,是将在待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两个寡聚核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增 2n 倍。该技术已成为分子生...
原理 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction PCR)是一种体外扩增特异性DNA片段的技术。它可以在体外特异地对目的基因进行大量扩增,其巧妙之处在预先设计合成二段分别与待测目的基因二端互补的引物,以起到指向定点的作用;再借助于DNA聚合酶催化的若干次...
一个较为详细的遗传连锁图谱不仅对该物种的遗传学基础研究有重要意义,同时对该物种的育种研究也很有帮助。Potlethwait和Stephen 等用RAPD技术进行斑马鱼遗传连锁图谱的制作。Liu把RAPD技术应用到鲶鱼基因图谱研究中。孙效文等建立了鲤鱼的遗传连锁图谱。图谱...
第三节 RAPD技术 一、 材料 不同来源的DNA(50ng/ul)。 二、设备 PCR仪,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,电泳装置。 三、试剂 1、随机引物(10mer) (5umol/L):购买成品。 2、Taq酶:购买成品。 3、10xPCR 缓冲液:配方见第八章。 4、MgCl2 :25mmol/L。 5、d...
第一节 概 述 DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基...
一、PCR应用特点 1.操作简便目前PCR技术采用耐高温Taq DNA聚合酶,并且在有电脑控制的DNA扩增仪中进行,使操作大为简化,一次加入的酶即可满足反应全过程。DNA扩增仪能自动迅速升降温度,只需把反应所需的全部材料混匀,置入仪器内,反应便依所输入的程序进...
一、请问PCR的检验一定准确吗? PCR检测艾滋病毒是利用截取病毒的ㄧ段RNA基因后,利用这段RNA进行复制(32次循环),得到大量相同的片段后进行检测。这个方法的最大好处是可以早期侦测是否感染,敏感性及特异性都非常的高。虽然这和每一个实验室的操作技术有...
实验原理 单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下,可以利用DNA聚合酶按53方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA,寡聚核苷酸片段称为引物(Primer),合成的互补DNA称为产物DNA。双链DNA分子经高温变性后成为两条单链DNA,它们都可作为单链模板DNA,在相...