④ 浓缩胶缓冲液：称取1mol/L HCl 48ml，Tris5.98g，TEMED 0.46ml，加重蒸水至80ml,调pH6.7，用重蒸水定容至100ml，置棕色瓶内，4℃贮存。 ⑤ 浓缩胶贮液：称Acr10g，Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml，过滤后置棕色瓶内，4℃贮存。 ⑥ 40%蔗糖溶液（W/V）...

一）原 理 由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制，因此可以形成连续系统和不连续系统两种电泳系统。不连续系统最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是：（1）使用两种不同浓度的凝胶系统；（2）配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不...

（3）电荷效应 在分离胶中，各种血清蛋白所带静电荷不同，而有不同的迁移率。表面电荷多，则迁移快，反之则慢。 因此各种蛋白质按照电荷多少、分子量大小及分子形状以一定顺序排成一个个区带。不连续PAGE所具有的分子筛效应、浓缩效应和电荷效应大大提高了它...

【目的和要求】 1. 掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理 2. 掌握垂直板状凝胶电泳槽的使用和凝胶的配制方法。 3. 学会利用相对迁移率分析蛋白质种类。 【实验原理】 带电颗粒在电场的作用下，向着与其相反的电极移动，称为电泳。 电泳做为一种物质分离及鉴定技...

一、目的 同工酶是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。研究表明，植物在发育过程中，所含同工酶的种类和比例都不相同，它们与植物的遗传、生长发育、代谢调节及抗性等都有一定关系，因此作为基因表达的产物，测定同工...

二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术（根据蛋白质等电点进行分离）以及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（根据蛋白质的大小进行分离）。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。 通常第一维电泳是等电聚焦，在细管中（1～3...

Tricine-SDS-PAGE是用于分离分子量在1-10kD的肽类用的。 一、 试剂配制： 1． Low Bis acrylamide（49.5% T, 3% C） Acylamide 48.0g Bis 1.5g Water make up to 100ml 2. High Bis acrylamide (49.5% T, 6% C) Acrylamide 46.5g Bis 3.0g Water make up to10...

四、实验步骤： ① 安装制胶模具（教师演示，学生安装） 注意事项：a、在整个过程中要轻拿轻放，以免将玻璃板弄碎。 ②制作分离胶(浓度10%) 分离胶配方(浓度10%):pH8.9 Tris-HCl溶液:0.8ml 分离胶PAG溶液:1.2ml 蒸馏水:1.6ml 10%TEMED:40l %AP: 40l 将上述溶...

3、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 系统的不连续性表现在以下几个方面： （1）凝胶板由上、下两层胶组成，两层凝胶的孔径不同。上层为大孔径的浓缩胶，下层为小孔径的分离胶。 浓缩胶：又称堆积胶。凝胶浓度较小，孔径相对较大。把较稀的样品加在浓缩胶上，...

一、目的 1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程 3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程 二、实验原理： 1、电泳原理及影响电泳的主要因素 带电离子在电场中的泳动速度（1）和迁移率（泳动度）（2） V= Eqa (1) 6r u= qa (2) 6r 由（2）...