RT-PCR简介 RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特...
常见问题 可能原因 建议解决方案 少量或没有 RT-PCR 产物 RNA 被降解 分离无污染，高质量的 RNA ；提取 RNA 的材料要尽量新鲜，防止 RNA 降解； RT 反应前，在变性胶上分析 RNA 的完整性； RNA 提取后，应储存在 100 ％甲酰胺中， 如果使用 RNase 抑制剂，加...
（一）、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 （二）、操作流程 1、原位PCR步骤 1）预处理： （1）切片常规脱蜡； （2）0.2mol/L HCl处理10min； （3）5g/ml蛋白酶K消化组织37℃10min； （4）Nase消化组织37℃ 30min； （5）梯度酒精脱水，室温干燥。 2）...
动脉炎病毒属(Arterivirus)?该属病毒为非虫媒病毒，马动脉炎病毒(EAV)为其代表种，此外，还包括其它3种病毒:乳酸脱氢酶增高症病毒(LDV)、猪生殖和呼吸系统综合症病毒(PRRSV)以及猴出血热病毒(SHFV)。目前尚未发现其它新成员。? 1.形态特征?动脉炎病毒粒子...
马动脉炎病毒?(Equinearteritisvirus,EAV)?马传染性动脉炎(EA)的临床特征是病马发热，步态僵直，躯干及眼周围水肿,出现粘液?脓性鼻炎，外生殖道水肿，妊马流产。本病在厩舍内迅速传播，公马也可接触感染。?1957年，美国Doll等人从俄亥俄州发生的以母马流...
5.抵抗力?病毒粒子有一层脂质囊膜，所以对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感。去氧胆酸盐易使EAV灭活。病毒在低温条件下极稳定，但不耐热。－30℃保存7年仍有活性,4℃可存活35天，但在37℃下仅能存活2天,而56℃30分种就可使其灭活。病毒对酸敏感。对0?5mg/ml浓度的胰...
猪生殖和呼吸系统综合症病毒?(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV) 猪生殖和呼吸系统综合症(间称PRRS)是近十年来发现的一种新的猪传染...
猪生殖和呼吸系统综合症病毒致病性? 6.致病性?猪是唯一感染PRRSV并出现临床症状的动物。病毒主要侵害繁殖母猪及其仔猪，造成严重的母猪繁殖障碍和小猪呼吸系统疾病，也可造成公猪的精液品质下降，而育肥猪发病多数比较温和。母猪感染后的症状比较明确，主要...
7.流行病学?美国1987年首先暴发PRRS，但后来用血清学方法证实1985和1986两年在美国收集的猪血清中就已经存在PRRSV的特异性抗体。1990年6月欧洲首次在德国发现该病流行，年末又在荷兰发现该病，两国的集约化猪场有近4000个猪群感染了PRRSV，并很快蔓延到其它...
猴出血热病毒?(SimianHemorrhagicFeverVirus,SHFV)猴出血热(SHF)是猕猴的一种高度致死的烈性传染...