RN A提取方法 下面以异硫氰酸胍结合氯仿-酚提取法介绍RNA的提...

标本的保存 血清（浆） HBV：分离出的血清（浆）如不立即提取核酸，保存于-20℃待检。 HCV：尽快分离血清(浆), 如不立即提取RNA， 保存于-20℃待检。 长期保存：吸取200l血清，加20u RNasin（RNA酶抑制剂），保存于-70℃。 已发出结果报告的标本应及时转移至...

应用聚合酶链反应（PCR）技术测定临床标本中的病原体核酸成分，是一种高度敏感，且最为直接的检测手段。由于临床标本中含有蛋白质、脂类等物质，可干扰PCR反应，故在做PCR反应前必须进行核酸提...

一．原理 PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP，这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程，因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多，商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。本实验中，Buffer PCR-A促使...

一、目的 了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用，掌握PCR反应基本技术。 二、原理 PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域，它不仅可用于基因分离克隆和...

2.2.2.3 操作程序 1．在无菌的Eppendorf管内加入以下反应物： 2．93℃ 反应2 min后开始以下循环： 93℃变性反应1 min； 50℃退火反应1 min； 72℃延伸反应3 min。 经过17～35循环后，最后一个循环72℃增加5 min。循环结束后反应产物置于40℃保存。 3．取1～5m...

1 导论 多聚酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）是美国 Perkin-Elmer/Cetus公司人类遗传研究室Mullis K. B.等人于1985年发明的一种快速体外DNA片段扩增技术，是八十年代分子生物学资源领域的一项革命性突破，被誉为分子生物学资源发展史上的又一里...

一、实验目的 1.掌握聚合酶链式反应的原理。 2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。 二、实验原理 PCR技术，即聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年获诺贝尔化学奖）建立的。这项技术可在试管内...

实验原理：PCR扩增是模拟天然DNA复制过程，利用DNA聚合酶在体外（试管中）扩增一对引物之间特异性DNA片段的方法。其主要热循环过程可分为三个步骤： （1）高温变性（denature）：提供DNA复制的有效模板。 （2）低温退火（anneal）：引物与模板DNA复性，提供游...

（2）反应增强剂：PCR反应中加入一定浓度的增强剂如1%～10%二甲基亚砜（DMSO）、5%～20%甘油、非离子去污剂、1.25%～10%甲酰胺和10～100 g/ml牛血清白蛋白等可提高反应特异性和产量，有些反应只能在这些辅助剂存在时才能进行。 （3）热启动PCR：如果PCR反应混...