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  • 支原体与细菌L型的检验2017-10-15 17:59:28

    第一节 支原体及其检验方法 3无细胞壁,能在人工培养基上生长的最小的微生物 一、分类:对人有致病性的有13个种 吸吸道:肺炎支原体 泌尿生殖道:人型支原体,解脲支原体,生殖道支原体 滑膜液:人型支原体 二、生物学性状 (一)形态:多形性,无细胞壁,由...

  • 噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤2017-10-15 17:58:43

    一、实验目的 以局限性转导为例来说明转导的基本原理,进一步验证 DNA是遗传物质,并初步掌握转导实验的基本方法。 二、实验原理与意义 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析...

  • 噬菌体的分离和鉴定2017-10-15 17:57:57

    部分菌株对应的噬菌体分离过程步骤: 1、噬菌体分离 (1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内,放入37 ℃温箱培养24h。(2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min ,离心2000r/ 10min ,上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。(3) 在普通琼脂平板底面分别注明1...

  • 噬菌体的鉴定方法和步骤2017-10-15 17:57:13

    1 样品采集 将一定的样品放入灭菌三角瓶中,加入对数生长期的敏感指示菌如大肠杆菌菌液3~5mL,再加20mL二倍肉汤蛋白胨培养液。 2 增殖培养 30℃振荡培养12~18h, 使噬菌体增殖。 3 离心分离 将上述培养液以3000rpm离心15~20min, 取上清液,用pH7.0,1%蛋白...

  • 噬菌体扩增和测滴度方法2017-10-15 17:56:29

    第一天 17:00:后用接种环取一单克隆细菌接种于LB培养液中,37C摇床过夜(不要超过16小时) 第二天 7:30:打开紫外灯,照射半小时(将器械放入通风橱中);8:00:将20mL的LB培养液放入250mL的三角烧瓶中,按1:100的比例稀释过夜培养的细(即放入200ul 的...

  • λ噬菌体DNA提取试剂制备、操作步骤和注意事项2017-10-15 17:55:43

    噬菌体是最早使用的克隆载体,噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径:其一是裂解生长,环状DNA 分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长,即感...

  • 噬菌体MOI(multiplicity of infection)值及其意义2017-10-15 17:54:24

    MOI 是multiplicity of infection的缩写,中文译为感染复数。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值,也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的...

  • pfu及噬菌体滴度测定方法2017-10-15 17:53:28

    pfu指的是噬菌体的空斑形成单位。以下是关于测定M13效价的一个方法: 测定噬菌体滴度 只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时(即细胞过量时),噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此,建议检测噬菌体贮液的...

  • 体外培养细胞的种类命名以及建立细胞系或细胞株要求和管理-12017-10-15 17:52:42

    各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,即文献中常称之为已鉴定的细胞(Certified Cells)。已鉴定的细胞可用于各种实验研究...

  • 肿瘤细胞培养成纤维细胞排除法介绍2017-10-15 17:51:57

    1.机械刮除法: 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝)、或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为: (1)标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位; (2...

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