问题 原因 对策 背景高 SDS及盐类等杂质未除尽 电泳结束后，取胶放入双蒸水或去离子水中，延长洗涤时间或增加洗涤次数。 染色过程中试剂变成蓝色 染色后未见 蛋白条带 SDS及盐类等杂质未除尽 电泳结束后，取胶放入双蒸水或去离子水中，延长洗涤时间或增加洗...
Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶，包括不同的成分，百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度，缓冲系统，上样孔格式以及胶的厚度，对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。 E-PAGE 96 High-Throughp...
实验试剂： 试剂贮备液： 1、 1mol/L HCl48ml，Tris36.6g，TEMED0.23ml，加蒸馏水配成100ml，pH8.9。 2、 1mol/L HCl48ml，Tris5.98g，TEMED0.46ml，加蒸馏水配成100ml，pH6.7。 3、 Acr28g，Bis0.735g，加蒸馏水配成100ml。 4、 Acr10g，Bis2.5g，加蒸馏水配...
各种浓度PAGE胶的配制（DNA电泳用） 50ml体系： 丙烯酰胺 有效分离（bp) 二甲苯青 溴酚蓝 丙烯酰胺30%（ml） 10TBE（ml) ddH2O（ml） TEMED（l） 过硫酸铵10%（l） 3.5% 100-1000 460 100 5.83 5 39.17 25.0 250 5.0% 100-500 260 65 8.33 5 36.67 25.0 250...
2、反应混合液配制 在0.5mL Eppendorf管中加入下列试剂： 稀释DNA 2 L primer 各0.5 L 10PCR Buffer 2.5 L dNTP 2 L MgCl2 1.5 L Taq酶 0.2 L 加dd H20至总体积 25 L 加完样后，加一滴石蜡油，离心混匀。放入PCR仪，盖好盖子。 3、SSR扩增程序 94℃ 3 min 94...
相关知识 SSR简介 所有真核生物基因组中都有一类叫微卫星（microsatellite）或简单序列重复（simple sequence repeats）的序列，它是由2-5个核苷酸首尾相连重复多次构成的一段DNA序列，具有很强的保守性。可以根据这段序列两边的序列设计引物，用PCR方法扩增...
原理] 蛋白质在十二烷基硫酸钠（SDS）和巯基乙醇的作用下，分子中的二硫键还原，氢键等打开，形成按1.4gSDS/1g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物，该复合物带负电，故可在聚丙烯酰胺凝胶电泳中向正极迁移，且主要由于凝胶的分子筛作用，迁移速率与蛋白质的分...
3．制备凝胶板 不连续体系采用不同孔径及pH的分离胶与浓缩胶 ，凝胶制备应分2步进行。 ① 分离胶的制备：根据实验要求，选择最终丙烯酰胺的浓度，本实验需20ml pH8.9 7.0 %PAA溶液，其加胶方式不同于连续系统。混合后的凝胶溶液，用细长头的滴管加至长、短玻...
③ 分析纯过硫酸胺（AP）（AR） 0.14g加重蒸水至100ml，置棕色瓶，4℃储存仅能用一周，最好当天配制。上述3种试剂用于制备分离胶。 ④ 浓缩胶缓冲液：称取1mol/L HCl 48ml，Tris5.98g，TEMED 0.46ml，加重蒸水至80ml,调pH6.7，用重蒸水定容至100ml，置棕色瓶...
（一）原 理 由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制，因此可以形成连续系统和不连续系统两种电泳系统。不连续系统最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是：（1）使用两种不同浓度的凝胶系统；（2）配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH...