(4)胶体金与蛋白A的结合和纯化,依上法测得所需的比例超过10%,即每30ml胶体中加入2mg蛋白A,5min后,加入0.3ml PEG作为稳定剂,然后以15000r/min离心45min(不同方法制备的金离心速度不同),略带红色的松散的复合物沉淀即为PAg复合物。小心弃去上清液,加...
金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很...
(2)0、5mol/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液:Tris,60.57g,1mol/L Hcl约420m1,调pH值至7.4,最后加双蒸水至1000m1,此为储备液。 (3)0、05mo1/L Tris缓冲生理盐水:氯化钠8.5-9g;0.5mo1/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液100m1;加双蒸水至1000m1,调pH值至7.4. (4)0...
PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性,又能保持高度的稳定性,PAg复合物...
斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫...
四、胶体金块快速免疫结合分析的应用 应用领域很广,可分为临床应用与非临床应用两类。目前应用多以前者为主。 1、临床应用 已应用于临床的很多领域。由于目前它还是定性分析,故主要用以检测正常体认中不存在的生物活性物质(如传染病的抗原及抗体),以及正...
随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断工业(diagnostic industry),免疫分析向两个方向发展:一类为全自动化的免疫分析;另一类为以硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。前者需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒,目前...
胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳...
ELISA法检测肺炎衣原体 肺炎衣原体感染广泛存在于全世界,以隐性感染为主。其临床表现多样,主要引起人非典型肺炎,还可引起咽炎、支气管炎、虹膜炎、肝炎、心内膜炎及结节性红斑等,亦是艾滋...
ELISA检测肺炎支原体抗体IgM [检测方法] ELISA [方法学原理] 将微孔表面包被纯化的肺炎支原体抗原,将被稀释过的患者血清加入微孔中,如存在支原体抗体可与微孔上抗原相结合,然后洗去未结合物质,再加入酶标记抗人IgM与抗原抗体复合物结合,洗去未结合的酶标...