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  • 293细胞的大规模培养2017-10-15 16:53:07

    293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因,治疗恶性肿瘤、心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶1C...

  • protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤-32017-10-15 16:52:21

    体外分化方法 第1步:ES培养基 在LIF存在的条件下维持细胞培养 第2步:EB培养基 使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。 1、分散纯化细胞(参见上面的细胞传代部分) 2、纯化 2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中,计数细胞取适量体积放入...

  • protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤-22017-10-15 16:51:35

    体外向心肌细胞方向分化 胚胎干细胞在体外去除LIF情况下会自然向心肌细胞方向分化,小鼠的R1系一般在第7-8天自然出现搏动的心肌细胞,与胚胎发育时间线是完全一致的。 培养基: EB 配制一20不含DMEM,FBS,LIF的溶液(该溶液也能用于ES培养基--见前述)。分装...

  • protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤-12017-10-15 16:50:52

    1、一般培养:保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基 细胞复苏 冻存细胞 明胶包被 细胞传代 2 、体外分化 培养基 包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可...

  • 神经胶质细胞培养方法2017-10-15 16:49:55

    神经细胞(神经元)不易培养,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。 人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培...

  • 原代神经细胞培养操作步骤2017-10-15 16:49:14

    1.取出生后1-3天内的大鼠脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍体积的Hank液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液。 2.为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5~10分钟后,细...

  • 巨噬细胞原代培养方法步骤2017-10-15 16:48:30

    1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤 1ml(勿注入肠内)。 2.引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3~5秒。 3.置动物于解剖台上,用针头固定四肢,双手持镊撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜,但勿伤及腹膜壁。 4.再用70%酒精擦洗腹...

  • RPMI1640培养基的配制及细胞培养的条件2017-10-15 16:47:45

    一、 培养基的特性细胞生存的环境与条件 1、温度条件(370.5℃) 2、pH条件 (7.2~7.4) 3、气体条件 4、水的质量(三蒸) 5、渗透压 6、营养条件 7、无菌条件 二、培养基的分类 1、平衡盐液 2、天然培养基(小牛血清、胚胎液) 3、合成培养基(化学成分清楚...

  • 细胞培养(cell culture)的一些常见问题与解答-22017-10-15 16:46:59

    6、血清的有关问题: 新生牛血清:新出生牛5天内取血制成 小牛血清:小牛出生16周以内采血制成。 胎牛血清:(进口血清)要求剖腹取胎制成。 国内厂家往往不能做到,经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。 根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为:...

  • 细胞培养(cell culture)的一些常见问题与解答-12017-10-15 16:46:14

    1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗? 不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0, 温度37 ℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化...

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