（一）实验程序 如不谨慎操作，外源性RNA酶可以通过下述途径污染RNA制品： （１）玻璃制品、塑料制品和电泳槽 灭菌的一次性使用的塑料制品基本上无RNA〈, /SPAN〉酶，可以不经预处理直接用于制备和贮存RNA。实验室用的普通玻璃器皿和塑料制品经常有RNA酶法染...
背景介绍 实验前方法/试剂的选择 问题解答 (外源性污染导致的问题不在本解答考虑中) RNA 抽提的三大纪律八项注意 Rnase 污染的10大来源 RNase 和 DEPC 处理 RNA 抽提的10大窍门 提高 RNA 得率 经典抽提小技巧 特殊组织的抽提 样品冻融的影响 RNA 质量的判断 R...
（一）试剂准备 1 ． TRIzol 试剂。 2 ．氯仿 3 ．异丙醇 4 ． 75% 乙醇（ DEPC H2O 配制） 5 ． DEPC H2O （二）操作步骤 1 ． 样品处理： （１）培养细胞：收获细胞 1-510 7 ，移入 1.5ml 离心管中，加入 1ml Trizol ，混匀，室温静置 5min 。 （２）组织：...
原理 核酸在机体生命活动中具有重要意义，核酸可分为核糖核酸和脱氧核糖核酸两类。酵母中富含的核糖核酸在碱处理下成为可溶性的钠盐与蛋白质等其它成分分开，然后用乙醇提...
目的 研究基因的表达和调控时，需要从组织或细胞中分离纯化RNA。RNA质量的高低常常影响RT- PCR、cDNA库构建和Northern Blot等分子生物学实验的成败。 主要试剂 Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出 的核酸...
1、实验目的 提取人体细胞的总RNA和mRNA。 2、本实验所需试剂 1）、 CNE-2细胞及培养细胞的一系列条件， 2）、PBS缓冲液， TRIZOL试剂， 3）、DEPC处理过的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管, 4）、新的氯仿、异丙醇和乙醇， 5）、mRNA分离试剂盒：Oligotex mRN...
【实验原理】 RNA与浓盐酸共热时发生降解，产生的戊糖又可转变为糠醛，在FeCl3或CuCl2催化下，糠醛与地衣酚（3,5二羟基甲苯）反应形成绿色复合物，该产物在670nm处有最大吸收。当RNA浓度为20g／m1~250g／m1时，吸光度与 RNA浓度成正比。 【实验材料】 1.实验...
大多植物病毒RNA为单链RNA，并且其极性与mRNA极性相同，植物病毒RNA提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获得满意结果。 一、材料 提纯TMV病毒液（10mg/ml）。 二、设备 冷冻台式离心机，低温真空干燥仪，电泳仪，电泳槽。 三、试剂 TE-饱和酚:氯仿（1:1），氯仿...
一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织。 二、设备 研钵，冷冻台式高速离心机，低温冰箱，冷冻真空干燥器，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小时）装蒸馏水，然后加入0.01%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高...
3）于0℃以5000g离心10分钟沉淀RNA，弃上清，用含0.1mol/L 乙酸钠（pH5.2）的70％乙酸洗涤沉淀，用自动微量移液器尽可能将乙醇吸尽， 随后于室温放置几分钟，晾干沉淀。切勿抽干沉淀，因为干的核酸沉淀很难溶解。 4）每个直径为90mm的培养皿或每107细胞加 200...