用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测的实验步骤 (1)将盖玻片、载玻片或培养板置于水平面上；如为1h或1h以下的短程孵育，则勿需湿孵，可将盖玻片或载玻片直接放置在实验台上。多个盖玻片则需置于Parafilm膜上，因为Parafilm膜有弹性，能够防止抗体溢出盖玻...

用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测及常见问题 间接法是用未标记的一抗和标记有HRP的二级试剂，经过简单孵育后，进行酶促反应。将抗体直接加入细胞中就可以使一抗与细胞上的抗原结合，在加入不同抗体或同一抗体不同稀释度的溶液时，注意不要发生交叉污染...

荧光素标记试剂与酶标试剂 (1)酶标试剂：酶标抗体仅需适当底物和普通光学显微镜即可高度敏感地检出抗原。由于信号是通过吸收光的差异，而非发射光来检测，底物的不溶性显色产物分布在酶所在位置的周围区域，因此这种检测方法尚不能达到荧光技术的分辨率。 酶...

ELISA检测筛选到的靶分子结合肽 【材料和试剂】 （1）酶标板，酶标仪 （2）湿盒 （3）吸水纸 （4）LB培养基 （5）PEG/NaCl （6）T （7）0.1M NaHCO3（pH 8.6） （8）HRP底物缓冲液 ABTS贮存液：在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液（pH 4.0）中溶解22mgABTS，过滤除菌...

ELISA检测噬菌体抗体与目的抗原的亲和力 【材料和试剂】 （1）酶标板 （2）酶标仪 （3）0.5mol/L Na2CO3(pH9.6) （4）1％A （5）HRP标记的抗M13噬菌体多抗 （6）2mol/L H2SO4 【操作步骤】 (1)将抗原用或0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)稀释至10g/ml; (2)对于要检测的...

免疫学方法（ELISA法）检测细胞凋亡 细胞凋亡事件发生时，会出现蛋白质和核酸分子结构的改变，形成新的表位。利用免疫学方法对这些表位进行鉴定，有助于判断样本中细胞凋亡事件的发生。 细胞凋亡的发生，是由于内源性核酸内切酶的激活，这种钙和镁依赖性核酸...

ELISA抗原竞争法检测样品中sIL-2R含量 【基本原理】 本法是用纯化或重组的IL-2R(链，P55，CD25，Tac抗原)蛋白包被96孔酶标反应板，同时加入已知量的抗IL-2RMcAb，再分别加入sIL-2R标准品与待测样品。则待测sIL-2R或者sIL-2R标准品与包被的纯化或重组的IL-2R蛋...

双抗体夹心ELISA法检测待测样品sIL-2R含量 【基本原理】 选用两株针对sIL-2R分子不同位点的单克隆抗体，即McAb1（包被抗体）与McAb2（酶标抗体）。先用McAb1包被固相载体，使待测sIL-2R与之特异性结合，然后再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的McAb2，则形成Mc...

双抗体夹心ELISA法检测待测样品sTNF-含量 【基本原理】 选用两株针对TNF-分子不同位点的单克隆抗体，即McAb1（包被抗体）与McAb2（酶标抗体）。先用McAb1包被固相载体，使待测sTNF-与之特异性结合，然后再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的McAb2，则形成McAb1-...

BA-ot-ELISA法检测抗体形成细胞 【试剂及配制】 （1） 包被液（pH 9.6 碳酸盐缓冲液） a2CO3 0.16g aHCO3 0.29g 蒸馏水加至 100ml （2） 洗涤液（pH 7.4 -Tween 20） KH2PO4 0.2g Na2HPO412H20 2.9g NaCl 8.0g KCl 0.2g Tween 20 0.5ml 蒸馏水加至 1000ml （3...