免疫酶染色法 (一) 原理 免疫酶染色法亦称免疫酶标组织化学法。标本制备后，首先将其内源酶抑制，接着即可进行免疫酶染色检查。常规的免疫酶染色法可分为直接法和间接法两种。前者固定标本中的抗原直接与酶标抗体结合，达到酶染色目的；后者是抗原先与其抗体(...

斑点酶联免疫吸附测定材料和方法 (以快速诊断口蹄疫为例) 斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点，而且还弥补了抗原或抗体对载体包...

BAS酶联免疫吸附试验材料和方法 (以筛选抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体为例) 1 材料 (1) 空肠弯曲菌共同抗原提取物，自制。 (2) 生物素化羊抗鼠IgG(AMG)，卫生部上海生物制品所。 (3) ABC试剂，卫生部上海生物制品所。如ABC试剂需自己配制，可按说明要求，...

生物素亲和素酶联免疫吸附试验 生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotinavidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强，结合迅速，且极其稳定，生物素标记抗体和酶的标记率高，又不影...

酶联免疫吸附测定ELISA操作中标本的收集 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清(浆)，有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前使用血清(浆)标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细...

酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统 一、AP底物放大系统(sutrate ampiification system) AP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1)，以乙醇作还原剂，在醇脱氧酶催比下，乙醇脱氢，NAD+还原为NADH，NADH在黄递酶的催化下脱氢，同时四唑盐(tetrazoliim)被还...

以生物素亲合素反应为基础的放大系统 生物素是维生素B复合物的水溶性成分之一，分子量244，可自卵黄提取或人工合成。生物素作为各种羧化酶的辅酶(又称为辅酶R或维生素H)参与各种羧化反应。 亲合素是从卵清中提取的一种67kD糖蛋白，生物素又叫维生素H，几乎存...

酶联免疫测定技术(ELISA)的放大系统 酶免疫测定自20世纪70年代初创立以来，由于其具有特异、灵敏、简便、快速的特点，现已在生物医学研究领域及临床疾病的诊疗中得到了广泛的应用，相对于放射免疫测定(RIA)技术来说，EIA还有试剂半衰期长，对环境污染小，试验...

蛋白(及酶)小分子半抗原结合物的制备 在临床实验室中，我们常常会遇到有关小分子物质如激素、治疗药物和毒品等的测定问题，而这些小分子通常分子量小于1 000，只是半抗原，仅有反应原性，没有免疫原性，如像蛋白大分子一样，将其直接免疫动物，不能得到小分子...

酶免疫测定的酶大分子蛋白结合物的制备 酶结合物可以说是酶免疫测定试剂盒的核心组成部分。通常酶免疫测定试剂盒的有效使用期限即是根据酶结合物的稳定性而定的。因为在酶免疫测定试剂盒中，最易受外环境影响的组成试剂即是酶结合物。此外，酶结合物的质量亦...