免疫测定中的固相支持物 免疫测定中的抗原抗体反应是在固相表面上进行的，因此，选择适当的固相及采用适当方法将特定的抗体或抗原吸附于固相上，是成功地建立一个免疫测定方法的基...

辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2，2吖嗪(3乙酰苯基噻唑磺酸6)[2，2azino-di(3ethylben2thiazolinesulphonicacid-6)，ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4氨基安替比林：苯酚耦联底物对等。上述色原底物受HRP作用主要有两...

碱性磷酸酶(AP)的色原底物 在ELISA测定中，碱性磷酸酶的色原底物最常用的是对硝基苯磷酸盐(p-nitropheny|phosate，)。在碱性磷酸酶的作用下生成对硝基酚()，其在入＝405 nm处有最大吸收. 由于碱性条件下的光吸收增强，并可使碱性磷酸酶失活，因而可使用碳酸钠...

用于免疫测定方法建立的抗原 在目前通常所用的免疫测定试剂盒中所用的抗原一般有三大类，即纯化抗原、合成抗原和基因工程抗原。 纯化抗原系指从人体液、组织或病原体培养物中采用物理化学方法如超速离心、过滤层析、电泳分离等所分离得到的目的抗原，如从HAg...

全自动酶免疫分析仪的基本原理和测定模式 目前绝大部分全自动免疫分析仪所采用的测定原理是酶免疫试验，这些分析仪又可称为全自动酶免疫分析仪，这一类分析仪根据其所用试剂是否为专用，又可分为试剂限定和试剂开放两类，试剂开放的全自动酶免疫分析仪相对较...

ELISA测定的常用模式--固相捕获法测IgM抗体 在病原体急性感染的诊断中，通常需检测IgM抗体，如急性甲型肝炎诊断的血清抗HAVIgM检测、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBc lgM检测和TORCH项目的系列IgM检测等。IgM抗体也有使用间接法测定的，如目前在市场上可见到...

ELISA测定的常用模式--竞争法测抗体 抗体的测定一般不使用竞争法。当抗原中杂质难以去除或抗原的结合特异性不稳定时，可采用这种模式测定抗体。如乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)和乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的测定，由于e抗原较核心抗原仅多29个氨基酸，e抗原很...

ELISA测定的常用模式--双抗原夹心法测抗体 间接法测抗体实际上测定的只有IgG类，而双抗原夹心法所测定的抗体则为所有各类，且不受非特异IgG的干扰，因此，双抗原夹心法测抗体的灵敏度和特异性要高于间接法。目前，为提高抗体测定的灵敏度，国内的间接法ELISA...

ELISA测定的常用模式--间接法测抗体 基本方法的操作如下: 1．将病原体的抗原在碳酸盐缓冲液中4~C过夜包被，形成固相抗原，洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗原后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭，洗涤去除未结合的部分及杂质。 2．加入含待测抗体的临床样...

大分子抗原因其具有两个以上的抗原决定簇，而可用双抗体夹心法测定，小分子半抗原如地高辛、茶碱等药物以及T3，T4及睾酮等激素因其只有一个抗原决定簇，从而无法使用双抗夹心方法测定，只能采用竞争抑制法测定。具体步骤如下： 1．先用抗小分子的特异抗体如双...