四 结果分析 编号 阳性片 待检片 阴性对照 结论 1 - - - 操作错误,抗体失效 2 + + + 非特异性着色 3 - + - 阳性片不含靶抗原 4 + - - 待检片不含定位抗原 5 + + - 待检片含定位抗原 染色结果的判断除了上述之外,还可以从以下方面加以判断: (1) 阳性反应...
一 基本原理 免疫组织/细胞化学是利用抗原抗体具有高度特异性结合反应的原理,采用已知抗体检测组织或细胞的抗原物质,然后以适当的方式显示其结合信号以证明组织或细胞是否存在未知抗原,并进行定性、定位或定量的研究。 二 基本步骤 1 三步法:以SP(链霉卵...
1、洗载玻片 将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中,...
SP法 1)脱蜡、水化; 2)PBS洗2~3次各5分钟; 3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室温静置10分钟; 4)PBS洗2~3次各5分钟; 5)抗原修复; 6)PBS洗2~3次各5分钟; 7)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。 8)滴加Ⅰ抗50l,室温静置1小时...
许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下,而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。 一些研究发现,切片在室温下保存3个月以上,免疫组化染色结果会出现减弱,甚至阴性。因此,有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同...
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中,新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外,80年代,新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以...
抗原修复主要用于福尔马林或多聚甲醛固定的石蜡包埋组织切片。 1、抗原热修复 (1)高压热修复 在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0)。盖上不锈钢高压锅的盖子,但不进行锁定。将玻片置于金属染色架上,缓慢加压,使玻片在缓冲液中浸泡...
1、4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)过夜,蜡块制作,切片,贴片。0.01M PBS清洗5min3次; 2、脱蜡、水化:用二甲苯两次10min,用梯度乙醇由低浓度到高浓度进行水化; 3、加入0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01M PBS 100ml+30%过氧...
一、免疫组化技术的基本原理 应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。 众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特...
由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点,且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起,所以,这门新技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。在病理学研究中,免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例,在免疫组化技术出现以...