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  • 凝胶层析法脱盐和分离蛋白质(附凝胶过滤法原理及基本操作)-12017-10-13 19:18:02

    (一)原理 凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为脱盐(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较...

  • DEAE—离子交换剂纯化血清IgG2017-10-13 19:17:22

    (一)原理 离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再...

  • 紫外吸收法测定蛋白质含量2017-10-13 19:16:35

    (一)原 理 蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基,它们的结构中具有共轭双键,对紫外光有吸收作用,其最大值在280nm波长处。在此波长附近,蛋白质溶液的光吸收值与其含量(范围是0.1~1.0mg/ml)成正比,因此,280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测...

  • 动物组织中DNA的制备2017-10-13 19:15:56

    (一)原 理 DNA是所有生物体的基本组成物质。真核生物DNA主要存在于细胞核中。制备DNA时应将细胞核膜打破方能释放出来。 细胞中的DNA和RNA分别与蛋白质相结合,形成脱氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在细胞破碎后,这两种核蛋白将混杂在一起。因此,要制备DNA首...

  • 标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量2017-10-13 19:15:17

    一、标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。 二、蛋白质含量测定方法 1、凯氏定氮法 2、双缩脲法 3、Folin-酚试剂法 4、紫外吸收法 5、考马斯亮蓝...

  • 蛋白质标准曲线的制作(马斯亮蓝法)2017-10-13 19:14:38

    一、实验目的和内容 目的: 学习考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度的原理和方法 内容:制作测定蛋白质浓度的标准曲线。 制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线...

  • 酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量2017-10-13 19:14:00

    一、 相关理论 1、 血清(浆)蛋白质是血清(浆)固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。 2、 血清(浆)蛋白质的分类: 目前已研究的有300 余种,已分离提纯的有100 余种,大部分在肝脏合成。 1) 盐析法可将血浆蛋白分为白蛋白(Albumin, Al...

  • 蛋白质浓度测定 Folin-Phenol (Lowry)测定法2017-10-13 19:13:20

    目的要求 (1)学习Folin-phenol法测定蛋白质含量的原理及方法。 (2)制备标准曲线,测定未知样品中蛋白质含量。 原理 目前蛋白质含量测定有两类方法,一类是利用蛋白质的物理化学性质,如折射率、比重、紫外吸收等测定得知;另一类是利用化学方法测定蛋白质含量...

  • 纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)2017-10-13 19:12:42

    原理:在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂。加入试剂后,采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过Percentage De...

  • 原位微量BCA蛋白定量法2017-10-13 19:12:04

    简述: 传统标准的BCA蛋白定量分析方法常规均使用试管或者微孔板进行检测,通过对传统方法进行改进,可使用BioTek公司的Take3TM 超微量多体积检测板进行原位微量BCA法蛋白定量分析。待测蛋白样品和BCA工作缓冲液按照顺序直接加在Take3TM板的微量定量孔处、温...

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