细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可...
1. 收到细胞株包裹时,请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形,若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养,或立即冷冻保存(置于-70 ℃,隔夜后,移到液氮)。 2. 冷冻细胞解冻程序: 2.1. 依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,...
一、原代细胞培养原理 原代细胞培养是将机体内的某组织取出,分散成单细胞,在人工条件下培养使其生存并不断生长、繁殖的方法。借助这种方法可以观察细胞的分裂繁殖、细胞的接触抑制以及细胞的衰老、死亡等生命现象。 幼稚状态的组织和细胞,如:动物的胚胎、...
细胞低温冷冻贮存是细胞室的常规工作。细胞冻存与细胞传代保存相比可以减少人力、经费,减少污染,减少细胞生物学特性变化。 一、冻存和复苏的原则:慢冻快融 当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰...
转管培养法(roller tube culture)是Gey 提出的,实验室常用,为了扩大细胞产量,将试管改用转瓶,故称转瓶培养,其培养方法是一样的,试管或转瓶固定在支加上,倾斜度为5~10左右,或将转瓶放在一排排转轴之间,使转瓶随着转轴以每小时6~12 转缓慢转动。细...
实验步骤 (一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。 (二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。 (三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。 (四)、将经抗生素浸...
一、有限稀释法 材料: a、96孔细胞培养板等; b、HT培养基; c、活力强的杂交瘤细胞; d、小鼠腹腔细胞。 方法: a、制备小鼠腹腔细胞。同细胞融合一节中的方法。 b、制备待克隆的杂交瘤细胞悬液,用含20%血清的HT培养基稀释至每毫升含2.5、15和50个细胞三种...
(2)术前准备 取一根脐带(离体3个小时内,平均1小时,剪去夹伤部位) 2个50ML注射器,1个30ML注射器和1个10ML注射器 1个止血钳,2根插管,14号线2CM长,消毒巾,消毒手术刀和无菌手套 手术区域准备:一块床单和无菌手套封套 3 脐带手术操作和培养 (1)用手...
一、试剂和缓冲液配制 1、胎牛血清(氯化十六烷基吡啶) (1)解冻胎牛血清 (2)在56℃加热30分钟(脱补体作用,盖上瓶) (3)取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏 (4)在-20℃冰冻馏份 2、磷酸盐缓冲液(PBS) (1)无钙镁离子的100ML的PBS(10)...
我要用人纤连蛋白包被培养板养细胞,请问自己如何包被,有无其他方法可替代? 以10g/l的纤连蛋白(Fibronectin)于4℃包被培养板过夜,接种细胞就可以了。 我用罗氏的Fibronectin 1mg/瓶,说明书推荐:配成50ug/ml,包被用量5ug/平方厘米。室温下包被40分钟,然...