藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法 藻红蛋白标记抗体的方法: 1. 巯基化藻红蛋白(PE)的制备; (1) 将600l浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中; (2) 将以上混合液和1.2ml pH6.8的混合,而后装入透析袋置入50mmol/L pH6...
正常人甲状腺细胞的原代培养方法 实验材料: 1. 甲状腺细胞材料来源:人孤立性良性甲状腺腺瘤旁边正常组织、甲状腺功能亢进甲状腺组织或甲状腺肿瘤组织均可作为研究的材料; 2. 不含Ca2+和Mg2+的1time,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养...
正常角膜缘干细胞的免疫染色 试剂和材料: 1.一抗: (1)ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100 (2)连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100 (3)细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE5----------- 1:500 (4)细胞角蛋...
正常人角膜上皮细胞和干细胞的分离 实验材料: 1.完整的人角膜; 2.GMF-Saline G; 3.中性蛋白酶Ⅱ,1.2U/ml(用DMEM/F12/GA稀释2.4U中性蛋白酶Ⅱ); 4.胰蛋白酶/EDTA; 5.DMEM/F12/GA; 6.DEME/F12/2FB/GA:DMEM/F12/GA含2%F; 7.CMF/GA; 8.LSC培养基; 9....
正常人原代角膜间质细胞的分离 实验材料: 1.完整的人角膜; 2.GMF-Saline G; 3.中性蛋白酶Ⅱ;PriCellls原代细胞分离试剂盒 4.L型胶原酶,1mg/ml在DMEM/F12/GA中; 5.GMF-Saline G配制的TrypLE Expre或0.25%胰蛋白酶; 6.DMEM/F12/GA; 7.DEME/F12/2FB/GA:...
利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞 试剂和材料: 1.24代的间质细胞; 2.H/2FB; 3.Hoechst 33342染料,1mg/ml水溶; 4.碘化丙啶(PI),2mg/ml水溶; 5.维拉帕米,500g/ml水溶; 6.DEME/2FB; 7.胰蛋白酶/TrypLE:TrypLE Expre或0.25%胰蛋白酶...
肿瘤组织源性原代细胞分离和培养 肿瘤组织源性原代细胞分离的常用方法: 组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法。 肿瘤组织源性原代细胞对药物筛选体系的益处: (1)肿瘤组织源性原代细胞培养需要的肿瘤组织较少; (2)不影响其他病理检查对肿瘤标本的需求...
从人关节软骨中分离软骨祖细胞 试剂和材料: 1.骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分; 2.链霉蛋白酶消化培养基:DMEM/F12(1:1)、5%的F、抗坏血酸 50g/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素(50mg/ml),0.2%(终浓度100g/ml)、链霉蛋白酶 70U/ml、HEP...
人软骨细胞的分化 试剂和材料: 1.分化培养基:DMEM/F12(1:1)、1%ITS(胰岛素、转铁蛋白、硒;V/V)、TGF-eta;1 1ng/ml、HEPES 10mmol/L; 2.胰蛋白酶/EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53mmol/L)A配制; 3.A:无Ca2+,Mg2+的Dulbeccorime磷酸盐缓冲液;...
MSCs分化为脂肪细胞 试剂和材料: 1.完全培养基(CCM):-MEM:-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经F杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100g/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周; 2.FDM(...